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單克隆與多克隆抗體的區(qū)別
點擊次數(shù)：2024 發(fā)布時間：2016-3-25
這首先要從抗體的產(chǎn)生來探討。把某一抗原免疫某種動物而得到單抗或多抗。如果用經(jīng)免疫過的動物的脾細(xì)胞獲得雜交瘤細(xì)胞，則得到單克隆抗體，如果用動物的血清，則得到多克隆抗體。但從理論上說，這些抗體都應(yīng)針對抗原來自的動物，例如如果用抗原免疫小鼠，則這些為鼠抗人。
由于一個大蛋白分子表面具有多種抗原決定簇，因此，免疫動物后，這些不同的決定簇分別誘導(dǎo)動物產(chǎn)生不同的抗體，每種抗體的特異性不同。單抗是有單個細(xì)胞起源的細(xì)胞克隆分泌的，所以只針對蛋白抗原的單一抗原決定簇，而多抗是有多個不同克隆的B細(xì)胞產(chǎn)生的，是多種細(xì)胞的混合物，但其中的每一種抗體也只是針對一種決定簇。多抗混合物中的每一抗體與蛋白抗原結(jié)合的能力是不同的，因此用多抗做實驗與用單抗可有其優(yōu)勢，那就是能確保抗體與抗原結(jié)合從而顯示抗原信息。但也有其缺點，那就是交叉反應(yīng)，往往造成假陽性。
從理論上說，用人抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體應(yīng)只能用于人類，但由于動物種屬之間，特別是相近的動物之間，如人與猩猩，大鼠與小鼠存在著同源性，導(dǎo)致抗體的交叉反應(yīng)，即用一種動物抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體也可與其它一些動物的抗原反應(yīng)。一般在商品化的產(chǎn)品說明書上都有說明。由于單抗只針對單一抗原決定簇，因此，其能導(dǎo)致的交叉 反應(yīng)很少，而多抗是混合物，導(dǎo)致的交叉反應(yīng)就多一些。但并不是向你所認(rèn)為的那樣，多抗可與所有種屬動物反應(yīng)。在選擇抗體時，如果你標(biāo)本來源于人，當(dāng)然應(yīng)選用如鼠抗人或兔抗人等。如果抗體來源確實不清，那應(yīng)該先預(yù)實驗。選擇已知陽性標(biāo)本，在充分設(shè)置陰性對照的前提下，用此抗體染色，看能否顯示陽性結(jié)果。