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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>普通試劑> Phos-tag® Acrylamide

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Phos-tag® Acrylamide

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富士膠片和光(廣州)貿易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中國的子公司,主營富士膠片和光品牌試劑產品,供應產品超50,000種,囊括了生命科學、藥品生產、品質管理領域、合成與材料、分析各個領域。


基于“想要為科研人員提供幫助”的創業初衷,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)作為一家滿足前沿研究領域需求的綜合試劑制造商,一直致力于生產和開發高品質的產品,并于2022年6月迎來了創業100周年。通過發揮企業優勢“技術力”,以及三大核心業務的試劑業務、化成品業務和臨床診斷業務來滿足學術界、企業以及醫療相關企業的廣泛需求。


憑借100 年的歷史經驗,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)在日本市場占據高份額,作為全球性的試劑供應商,以“成就科學未來之力,創造幸福源泉”為愿景,致力于高品質試劑的生產與開發。通過提供試劑,為再生醫療、癌癥、精神/神經疾病和抗體藥物等各類基礎研究和前沿研究做貢獻,并獲得 ISO9001等多項國際認證。基于可靠的技術和品質以及科研人員之間的信賴,作為富士膠片集團的一員將不斷實現全球化發展。


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主要業務——試劑


作為富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)試劑業務的中國子公司,富士膠片和光(廣州)貿易有限公司可提供各個領域測試和研究用途的生命科學試劑和化學試劑。


試劑業務

可廣泛提供生命科學和化學領域的測試研究用產品



生命科學領域


化學領域



 

培養基生產

 ● 抗體制備

 ● 定制服務



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認證標準品

 ● 有機化學


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作為優質的試劑企業,我們可以提供滿足不同客戶需求的高品質產品。試劑業務自創業以來,已持續不斷地提供了廣泛領域的試劑產品,并致力于成為滿足前沿技術領域各項研究需求的試劑制造商。今后也將以過往技術經驗為基石,發揮作為可信賴的研究支持合作伙伴的作用。



產品一覽

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● 常規試劑

● 有機合成試劑

● 環境分析試劑

● 精密分析試劑

● 色譜試劑

● 生化學用試劑

● 基因研究用試劑

● 免疫研究用試劑

● 病理研究用試劑

● 細胞培養用試劑

● 內毒素檢測用試劑

● 生物藥生產用培養基

● 研究用基礎培養基

● 定制服務

● 設備和耗材










豐富的產品類目以及快速供應體系

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致力于持續監測市場的需求并跟蹤世界的研究動向。為了能夠及時準確地響應客戶的需求,富士膠片和光建立了以自有品牌為中心的豐富產品體系,為各界的研究和開發領域提供細致的服務與支持 。













高品質的試劑提供和生產體系

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試劑生產工廠以東京工廠和大阪工廠為中心,發揮優質技術力量建立的高品質生產體系。愛知工廠配備齊全的培養基生產設備,可用于生產再生醫療和生物制藥生產用的培養基。













優質的客戶服務和產品信息

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通過定期更新的主頁網站、富士膠片和光生物微信公眾號、富士膠片和光化學分析微信公眾號,以及不定期的富士膠片和光生物視頻號、網絡研討會和線下展會,致力于為客戶提供優質的服務以及不斷更新的產品信息。













強化全球化事業的開展

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建立日本海外銷售體系,通過提供富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)優質研發力量生產的高品質產品,積極推進全球化業務。














企業歷史沿革


年份

內容

1922年6月

  從武田長兵衞商店(現武田薬品工業株式會社)的化學藥品部門獨立出來,成立了武田化學薬品

 株式會社

1940年

  大阪工廠竣工

1944年

  東京工廠竣工

1947年

  更名為和光純薬工業株式會社

1950年

  展開化成品業務

1952年

  總部遷移至大阪

1960年

  展開臨床檢測藥業務

1968年

  播磨工廠竣工

1972年

  公司總部竣工

1974年

  成立德國和光純薬有限會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美國和光純薬株式會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建設東部配送中心

1991年

  建設西部配送中心

2004年

  愛知工廠竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化學有限公司(今?富士膠片和光純藥(上海)化學有限公司)

2015年

  收購株式會社シバヤギ(今?群馬辦事處)

2017年

  成為FUJIFILM Corporation的全資子公司

2018年

  更名為富士膠片和光純藥株式會社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今?戶田辦事處)

2022年

  成立100周年





























生物化學試劑、儀器和耗材

供貨周期 一個月以上 應用領域 生物產業

用于通過 SDS-PAGE 分離磷酸化蛋白質Phos-tag® Acrylamide

Phos-tag® Acrylamide


僅需將Phos-tag® Acrylamide與丙烯酰胺溶液混合并聚合,即可生成用于分離磷酸化和非磷酸化蛋白質的Phos-tag® SDS-PAGE。

在不使用放射性同位素的情況下,利用 Phos-tag™ SDS-PAGE 即可分離不同條帶中的磷酸化和非磷酸化蛋白。分離后的凝膠可用于 Western blotting 和質譜分析等后續實驗。

Phos-tag™ SDS-PAGE 操作簡單,只需在常規 SDS-PAGE 膠中加入 Phos-tag™ Acrylamide 和 Mn2+ 或者 Zn2+ 即可進行實驗。在電泳過程中,磷酸化蛋白的磷酸基團與 Phos-tag™ 中的二價金屬離子相結合,降低其遷移速度,從而可區分磷酸化與非磷酸化蛋白。


Phos-tag® Acrylamide



優點、特色


● 采用 Phos-tag™ SDS-PAGE 可輕松分離磷酸化蛋白

無任何放射性元素及化學標記!

不論氨基酸殘基的類型/位點如何,均可使用

可用于未知的磷酸化分析

可用于檢測新的磷酸化位點(無需購買商品化磷酸化抗體、無需特意制備磷酸化抗體)

磷酸化位點數量/位點不同的磷酸形式也可分離

顯示磷酸化程度和磷酸化形式

可同時檢測磷酸化/非磷酸化形式

可定量各種磷酸化形式

可簡單明確有無磷酸化

無需RI或特殊的儀器

實驗成本低,操作簡單。(SDS-PAGE的試劑→只要有設備即可使用)

電泳后可用于WB、MS分析,也可用于二維電泳

WB:可分析內源性蛋白

MS:可顯示各磷酸化形式的磷酸化位點的組合

二維電泳:可分離相同等電點和分子量的磷酸化形式

適用于內源性蛋白的磷酸化分析!



Phos-tag® SDS-PAGE的原理


Phos-tag® Acrylamide的結構


Phos-tag® Acrylamide


Phos-tag® Acrylamide


1. 電泳中的磷酸化蛋白會被2個二價金屬離子捕獲

2. 磷酸化水平越高,電泳速度越慢

3. 根據磷酸化水平進行分離(即使磷酸化位點的數量相同,只要位置不同也可進行分離)

常規的SDS-PAGE(上圖:非Phos-tag® 條件下)中,無法確認底物是否被磷酸化。



案例、應用


Phos-tag® Acrylamide



Phos-tag® Acrylamide



【使用Phos-tag™ SDS-PAGE的磷酸化/非磷酸化蛋白比較】


“我推薦使用Phos-tag ™ ——東京大學研究院醫學研究科 小川覺之”


  Phos-tag ™ 是專為研究磷酸化蛋白而新開發出來的試劑。此產品使用方便,不但可用于體外實驗,還能定量分析體內蛋白的磷酸化水平。Phos-tag ™ SDS-PAGE 可用于常規電泳實驗,無需購買特殊設備,性價比高。傳統蛋白磷酸化的研究需要特異的磷酸化抗體、RI 等其它試劑,操作復雜,花費大,且放射性元素會有安全隱患,而 Phos-tag ™ 的出現恰恰可以彌補這些缺點,為磷酸化蛋白研究提供新的方向。


磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分離效果圖


Phos-tag® Acrylamide


  Lane 1 為非磷酸化蛋白,Lane 2-5 為磷酸化蛋白,各蛋白因磷酸化狀態不同而條帶遷移率也有所不同。

  磷酸化/ 非磷酸化蛋白的數量比、磷酸化程度、磷酸化蛋白的豐度等都可根據條帶遷移和條帶濃度求得。


【資料提供】

日本東京大學研究生院醫學系研究科



【二維電泳中的應用:分析 hnRNP K 磷酸化異構體】


  小鼠巨噬細胞 J774.1 經 LPS 刺激后,裂解細胞,經過免疫沉淀法分離得到 hnRNP K 。在二維電泳中,一維是IPG 膠,二維是 Phos-tag ™ SDS-PAGE,可分離 hnRNP K 的異構體。利用質譜儀,可以確認不同的點代表不同的亞型或修飾蛋白。


二維電泳


Phos-tag® Acrylamide


  同一個等電點的位置上,不同位點發生磷酸化都可以被區分開來(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)


【參考文獻】

Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics , Nov 2010; 10(21): 3884-95.


【結果提供】

  橫濱市立大學 生命納米系統科學研究科 生物體超分子系統科學專業 木村彌生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)理化學研究所 RCAI 小原收



【EGF 刺激前后MAPK 磷酸化水平的變化】


  常規 SDS-PAGE 和Phos-tagTM SDS-PAGE 后迚行克疫印跡實驗分析 EGF 刺激的 A431 細胞中 MAPK 磷酸化水平。


Phos-tag® Acrylamide

  

摘自 Kinoshita-Kikuta, E. et al., Mol.Cell. Proteomics. (2007)6: 356.



【使用示例:α-酪蛋白去磷酸化反應隨時間的變化】


使用Phos-tag® SDS-PAGE和常規SDS-PAGE分離堿性磷酸酶隨時間(孵育時間:0~120 min)去磷酸化的α-酪蛋白樣品。


Phos-tag® Acrylamide



相關產品


 產品名稱

 用  途

 Phos-tag™ Acrylamide

 分離: SDS - PAGE 分離不同磷酸化水平的蛋白

 SuperSep Phos-tag™

 分離: 預制膠中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide

 Phos-tag™ Biotin

 檢測: 代替 Western Blot 檢測中的磷酸化抗體

 Phos-tag™ Agarose

 純化: 通用柱層析,純化磷酸化蛋白

 Phos-tag™ Mass

 Analytical Kit

 分析: 用于質譜 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的檢測靈敏度


phos-tag™ 由日本廣島大學研究生院醫齒藥學綜合研究科醫藥分子功能科學研究室開發,對應指導手冊請通過以下鏈接獲取:

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/pdf/show/19.html



操作視頻,請點擊:


樣品處理(TCA沉淀):http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/47.html

凝膠制備:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/48.html


已公開的驗證蛋白列表,請查看鏈接:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/gories/show/123.html





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