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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>BF6007 NAD-蘋果酸酶試劑盒 輔酶Ⅱ

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BF6007 NAD-蘋果酸酶試劑盒 輔酶Ⅱ

具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
  • 品牌 NobleRyder/諾博萊德
  • 型號 BF6007
  • 產地 北京
  • 廠商性質 生產廠家
  • 更新時間 2025/3/31 14:53:31
  • 訪問次數 64

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      北京諾博萊德科技有限公司成立于2012年,是一家致力于各類生化試劑、標準品、小分子抑制劑、液體試劑等相關產品的研發與銷售的企業, 旗下擁有“NobleRyder自主品牌”。公司產品種類齊全,庫存量充足,旨在為全國乃至于世界各地科研機構、工業、電子、醫療、科技等領域的客戶, 提供系統的產品資源及配套技術服務。 NobleRyder秉承博采眾長、誠信為本、德行天下的宗旨服務于客戶。公司合作單位及客戶包括各大醫院、科研機構、大專院校、制藥單位、醫學檢驗單位、衛生防疫、生物技術公司、食品單位等諸多領域,正逐步成長為優秀的生化試劑和耗材供應商。





生化試劑,緩沖液,抗體,試劑盒,分子生物學試劑,細胞培養基,血清

供貨周期 現貨 規格 50T/48S
貨號 BF6007 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 ME 廣泛存在于微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高

NAD-蘋果酸酶(Malic enzyme,NAD-ME)試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48

NAD-蘋果酸酶試劑盒 輔酶Ⅱ

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

ME 廣泛存在于微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME 催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應,產生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應,是蘋果酸代謝的關鍵酶。 ME 活性與生物合成和抗氧化密切相關。近年來植物 ME 活性測定較多,已經成為抗氧化研究的熱點。根據輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME 分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測定原理:

NAD-ME 催化NAD+還原成NADH,在 340nm 下測定NADH 增加速率。

組成:

產品名稱

BF6007-50T/48S

Storage

提取液:

60ml

4℃

試劑一:液體

40ml

4℃

試劑二:液體

20ml

4℃

試劑三:粉劑

1  

4℃

試劑四:粉劑

1  

-20℃

說明書

一份

試劑三:粉劑×1 支,4℃保存;用時加 2ml 蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑四:粉劑×1 支,-20℃保存;用時加 1ml 蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 ml 石英比色皿和蒸餾水。

樣本的前處理:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或細胞

(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

2、將試劑一、二、三和四置于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上。如果一次性測定樣本較多,可將試劑一、二、三和四按下表比例配成混合液后置于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上(現配現用)。

3、操作表:

試劑名稱(μl)

測定管

試劑一

600

試劑二

225

試劑三

30

試劑四

15

樣本

30

將上述試劑按順序加入 1 ml 石英比色皿中,混勻,立即記錄 340 nm 波長下初始吸光度A1 和反應 1min

后的吸光度A2,計算ΔA=A2-A1。

注意:如果ΔA<0.005,可將反應時間延長到 2 分鐘或 5 分鐘。

NAD-ME 活性計算:

按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T= 4823×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g 組織每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T = 4823×ΔA÷W

按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T =9.646×ΔA

V 反總:反應體系總體積,9×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm; V 樣:加入樣本體積,0.03 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。


NAD-蘋果酸酶試劑盒 輔酶Ⅱ



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