TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白組學分析檢測技術服務詳情介紹

iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和(Tandem Mass Tags)技術是分別由美國AB Sciex公司和Thermo Fisher公司研發的多肽體外標記定量技術。這兩種技術采用多個（2-10）穩定同位素標簽，特異性標記多肽的氨基基團進行串聯質譜分析，能夠同時比較多達10種不同樣本中蛋白質的相對含量，可用于研究不同病理條件下或者不同發育階段的組織樣品中蛋白質表達水平的差異。 對于可以傳代的細胞樣品來說，我們可以采取的方法完成對于細胞蛋白質組的標記過程，但是許多其他研究體系，比如組織樣品以及不能進行傳代培養的細胞來說，需要其他的標記方法來完成定量蛋白組學分析。TMT, iTRAQ等基于體外（in vitro）標記的定量方法應運而生。 iTRAQ標簽包括三部分，如下圖： 1. 報告基團（reporter group）：指示蛋白樣品豐度水平。 2. 平衡基團（balance group）：平衡報告基團的質量差，使等重標簽重量一致，保證標記的同一肽段m/z相同。 3. 肽反應基團（amine-specific reactive group)：能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發生共價連接，從而標記上肽段。TMT

SILAC

iTRAQ和TMT標簽結構圖

來自不同樣品的同一肽段經TMT/iTRAQ試劑標記后具有相同的質量數，并在一級質譜檢測（MS1）中表現為同一個質譜峰。當此質譜峰被選定進行碎裂后，在二級質譜檢測（MS2）中，不同的報告基團被釋放，它們各自的質譜峰的信號強弱，代表著來源于不同樣品的該肽段及其所對應的蛋白的表達量的高低。TMT/iTRAQ定量蛋白組學研究因其測定jīngzhǔn度高適應樣品種類多，目前已有很廣泛的應用。百泰派克在傳統的TMT/iTRAQ分析技術的基礎上，提供TMT/iTRAQ/MultiNotch MS分析技術，使用三級碎片報告離子進行定量，可進一步提高TMT/iTRAQ定量蛋白組學分析的精度，進一步提高定量準確性。 百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺，Orbitrap Fusio Lumos質譜平臺結合Nano-LC，推出基于TMT/iTRAQ/MultiNotch MS的定量蛋白組分析服務技術包裹，您只需要將您的實驗目的告訴我們并將您的蛋白寄給我們，我們會負責項目后續所有事宜，包括蛋白酶切、肽段標價、肽段分離、質譜分析、質譜原始數據分析、生物信息學分析。

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析實驗流程

iTRAQ 8-plex定量蛋白組學分析流程

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析技術特點

• 高通量定量蛋白分析：可以同時分析10個樣品；適合大量臨床樣本，多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物 • 體外標記，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品 • 質譜分析靈敏度高，可檢測較低豐度蛋白，大范圍比較蛋白相對豐度 • 可與富集磷酸化等修飾肽段的方法聯用，更準確研究翻譯后修飾變化

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析樣品要求

TMT-iTRAQ-MultiNotch定量蛋白組學分析樣品要求

注意：樣品運輸請使用足量的干冰運輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運輸過程中樣品降解的可能性。

中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克生物科技會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關的質譜參數（中英文） 3. 質譜圖片 4. 原始數據 5. 蛋白差異水平分析 6. 生物信息學分析

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種蛋白質標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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