供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/48S |
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貨號 | BO6002 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。 |
土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)測定試劑盒說明書
微量法 100 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:
S-UE 能夠水解尿素,產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和速效氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。
測定原理:
利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的 NH3-N。
土壤脲酶測定試劑盒 土壤系列-常備現貨
試劑的組成和配制:
產品名稱 | BO6002-100T/48S | Storage |
試劑一:甲苯 | 2ml(自備) | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | -4℃ |
試劑三:液體 | 22ml | 4℃ |
試劑四:A 液 | 1 支 | 4℃ |
試劑四:B 液 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑五:液體 | 2ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,臨用前加入 9ml 蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑 4℃保存;試劑四A 液:液體×1 支,4℃保存;試劑四B 液:液體×1 瓶,4℃保存;臨用前將 A 液倒入 B 液中混合,待用;用不完的試劑 4℃保存一周。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干,過 30~50 目篩。
測定步驟:
1 、培養
測定管 | 對照管 | |||
風干土樣(g) | 0.05 | 0.05 | ||
試劑一(μl) | 20 | 20 | ||
振蕩混勻,室溫放置 15min | ||||
試劑二(μl) | 90 | |||
蒸餾水(μl) | 90 | |||
試劑三(μl) | 190 | 190 | ||
混勻,放入 37℃水浴培養 24h 后,10000g 25℃離心 10min,取上清液。 |
2、將培養結束的上清液稀釋 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸餾水)。
3、測氨量(在微量石英比色皿或 96 孔板中加入下列試劑):
測定管 | 對照管 | |
稀釋后的上清液(μl) | 80 | 80 |
試劑四(μl) | 15 | 15 |
試劑五(μl) | 15 | 15 |
充分混勻,室溫放置 20min | ||
蒸餾水(μl) | 90 | 90 |
混勻,于 578nm 處,蒸餾水調零,讀吸光值 A,計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。
脲酶活力計算:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x 為標準品濃度(μg/ml),y 為吸光值A。單位的定義:每天每 g 土樣中產生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。
脲酶活力(μg/d/g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)
10:稀釋倍數;T:反應時間,1d; V 反總:反應體系總體積:0.3ml;W:樣本質量,0.05g。
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373;x 為標準品濃度(μg/ml),y 為吸光值A。單位的定義:每天每 g 土樣中產生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。
脲酶活力(μg/d /g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V 反總÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)
10:稀釋倍數;T:反應時間,1d; V 反總:反應體系總體積:0.3ml;W:樣本質量,0.05g。