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微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測

參考價 390
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上海軒澤康生物有限公司,坐落于繁華大都市中上海 ,主要經營銷售ELISA檢測試劑盒/酶聯免疫試劑盒、實驗耗材、儀器、試劑、細胞等生物化學試劑。 elisa試劑盒、生物科研試劑、實驗耗材等。(注:我們的產僅供科研實驗,不能用于醫療臨床。)
公司自成立以來,就非常注重企業信息化的建設。我們的客戶關系管理體系和客戶關系管理團隊,能響應客戶的售前、售中、售后需求,關注客戶體驗及滿意度,為您提供業耐心的服務。我們堅持“誠信創新,合作共贏”;我們將為您提供便捷的采購服務,節省您的時間和成本。
上海軒澤康生物有限公司企業口號:
拼搏進取,互利共贏!
企業愿景:
嚴格質控體系,完善企業制度,創造性發展,成為科研服務行業企業!
企業使命:
為客戶:創造價值 以客戶為核心
為員工:創造公平升職性的成長空間
為社會:貢獻美好未來
企業核心價值觀:
誠信、用心、共贏、創新
經營理念:
共贏、發展、感恩
人才理念:
以人為本、唯才善用








酶聯免疫試劑盒 ,ELISA檢測試劑盒 ,生化試劑盒,生物試劑,細胞,抗體等。

供貨周期 現貨 規格 50管/48樣
應用領域 醫療衛生,化工,生物產業,能源,制藥/生物制藥 主要用途 檢測過氧化物酶活性

規格:100T/96S

產品內容:微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 0.2mL×1 瓶,4℃保存;用時加入 3mL 試劑一,現配現用,可 4℃保存一周;

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水

操作步驟:

一、粗酶液提取:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備

收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。二、測定步驟:

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 470nm,蒸餾水調零。

2、 測定前將試劑一、二和三在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)放置 10min 以上。

3、 樣本測定表

試劑名稱(µL)

測定管

試劑一

120

試劑二

30

試劑三

30

蒸餾水

60

樣本

5


 

在 EP 管中按順序加入上述試劑,立即混勻并計時,立即取 200µL 轉移至微量玻璃比色皿或 96

孔板中,記錄 470nm 下 30s 時的吸光值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。計算?A=A2-A1。

POD 活性計算:

用微量玻璃比色皿測定的計算公式如下

1、按血清(漿)體積計算

單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。POD(U/mL)=?A÷0.01×V 反總÷V 樣÷T =4900×?A

2、按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。POD(U/mg prot)=?A÷0.01×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T =4900×?A÷Cpr

3、按樣本鮮重計算

單位定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。POD(U/g 鮮重)=?A÷0.01×V 反總÷(W÷V 樣總×V 樣)÷T =4900×?A÷W

4、按細菌或細胞數量計算

單位定義:每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。POD(U/104 cell)=?A÷0.01×V 反總÷(500÷V 樣總×V 樣)÷T =9.8×?A

用 96 孔板測定的計算公式如下

1、按血清(漿)體積計算

單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/mL)=?A÷0.005×V 反總÷V 樣÷T =9800×?A

2、按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/mg prot)=?A÷0.005×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T =9800×?A÷Cpr

3、按樣本鮮重計算

單位定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/g 鮮重)=?A÷0.005×V 反總÷(W÷V 樣總×V 樣)÷T =9800×?A÷W

4、按細菌或細胞數量計算

單位定義:每 1 萬個細菌或細胞在每mL 反應體系中每分鐘A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/104 cell)=?A÷0.005×V 反總÷(500÷V 樣總×V 樣)÷T =19.6×?A

V 反總:反應體系總體積,0.245mL;V 樣:加入樣本體積,0.005mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測注意事項:

1、 如一次測定的樣本數量較多,可將試劑一、二、三和蒸餾水按照比例混合,在 37℃(哺乳動物) 或 25℃(其它物種)放置 10min,測定時加入 240µL 即可。

2、 樣本測定值如果小于 0.005,可將反應時間延長到 3-5 分鐘,計算時除以反應時間即可;如果高于 0.5,可將樣本用提取液進行稀釋。計算時乘以相應的稀釋倍數即可。





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