P68546 pCMV-3×FLAG-Atg7(rat)-Neo
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海禾午生物科技有限公司
- 品牌 禾午生物
- 型號(hào) P68546
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/5/23 21:01:54
- 訪問(wèn)次數(shù) 29
產(chǎn)品標(biāo)簽
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| 供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | P68546 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 僅供科研 |
| 名稱(chēng) | pCMV-3×FLAG-Atg7(rat)-Neo |
| 別稱(chēng) | NM_001012097.1;Apg7l |
| 基因長(zhǎng) | 2097bp |
| 質(zhì)粒宿主 | 哺乳細(xì)胞 |
| 質(zhì)粒用途 | 蛋白表達(dá) |
| 片段類(lèi)型 | ORF |
| 片段物種 | 大鼠 |
| 原核抗性 | Amp |
| 篩選標(biāo)記 | Neo/G418 |
| 啟動(dòng)子 | CMV |
| 復(fù)制子 | pUC |
| 感受態(tài) | DH5a |
| 溫度 | 37度 |
| 背景載體 | pCMV-T7-3×FLAG-MCS-Neo |
| 正向引物 | CMV-F |
注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱(chēng)、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱(chēng)和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；
2、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記；
3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；
4、42℃熱激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；
6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；
7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；
8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；
9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒
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