分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復雜的光，分解為光譜線的儀器。測量范圍般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

原理

分光光度計采用個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生定波長的光源，光線透過測試的樣品后，分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關系如下式:

A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

I。為入射的單色光強度;

I 為透射的單色光強度;

T 為物質的透射率;

k 為摩爾吸收系數(shù);

L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長;

c 為物質的濃度;

物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。

操作方法

1.接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至"1"檔(若零點調節(jié)器調不到"0"時，需選用較。)

3.根據(jù)所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數(shù)盤針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)"100"調節(jié)器，使管的t=100，針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

注意事項

1.該儀器應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩(wěn)的作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

2.使用本儀器前，使用者應該了解本儀器的結構和作原理，以及各個操縱旋鈕之能。在未按通電源之前，應該對儀器的安性能行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。

3.在儀器尚未接通電源時，電表針于"0"刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲行調節(jié)。

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分光光度計如何操作

操作方法

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