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細胞培養級DMSO的用途有哪些?

時間:2023/10/25閱讀:1070
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二甲基亞砜簡稱DMSO。是一種含硫的有機物,能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等有機物。常溫下為無色無臭的透明液體。細胞培養試驗中,DMSO一般用作藥物溶劑,要求染毒時其濃度不超過0.1%。也配制成高濃度的母液,稀釋時取少量到培養基中,而細胞凍存時DMSO的濃度一般為10%。另外DMASO也是一種一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產物的通透性。

二甲基亞砜DMSO的用途:
1、DMSO廣泛應用在人、動物細胞株及細菌噬菌體λ的低溫防護中。
2、DMSO作為緩沖液的成分,用于以下的實驗:Poly(A+)RNA的純化, E. coli感受態細胞轉化、PCR反應、cDNA文庫的擴增、DNA測序、DEAE-葡聚糖介導的細胞轉染、聚凝胺介導的DNA轉染。
3、DMSO回收膜過濾后的DNA,用于接下來的PCR擴增反應。
4、用于DNA測序的毛細管電泳技術將5% DMSO (v/w)混入2 M尿素中,如果需要可以調整DMSO濃度到100%。
5、不同濃度的DMSO與寡核苷酸的熔點溫度關系。
6、低溫冷凍前用含有DMSO的培養基高溫培養雜交瘤細胞。
7、利用DMSO修飾蛋白中的磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸殘基用作磷酸化狀態的質譜分析(MS)。

DMSO在細胞凍存中的應用
二甲基亞砜是一種重要的滲透型細胞保護劑。在深低溫(零下200度)保存細胞時凍存過程中,為防止細胞內液冰晶形成、滲透壓改變、細胞結構紊亂等導致的損傷,有必要使用含有DMSO冷凍保護劑。DMSO能夠快速穿透細胞膜進入細胞中,降低冰點、延緩凍存過程,同時提高細胞內離子濃度,減少細胞內冰晶的形成,從而減少細胞損傷。深低溫時二甲基亞砜的細胞毒性受到抑制。復蘇時動作要快,盡快洗掉二甲基亞砜,否則會造成對細胞嚴重的毒性。二甲基亞砜(DMSO)是目前細胞凍存保護劑,但也是一種以細胞毒性很大的化學試驗劑。研究結果表明,培養液中DMSO濃度為10%時,細胞生長抑制率近100%;1‰濃度時抑制率為35%,即使是0.04‰的濃度,DMSO對細胞的生長也有不利的影響。

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