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抗凝血因子Ⅷ抗體自身抗原
閱讀：510 發布時間：2011-8-22雖然經研究發現，抗凝血因子Ⅷ（FⅧ）抗體的陽性率極底，但是這種自身抗體卻不容忽視，它常是抑制機體凝血系統的zui主要因素。
血栓形成與止血委員會曾對在過去的十年中經118名內科醫師確診的215名帶有FⅧ：C抑制因子的非血友病患者進行一項深入地調查。發現有46％的人沒有明顯的臨床癥狀，但隨著年齡的增長，其自身抗體增多的危險性也隨之增大，17％的帶有自身抗體的患者年齡在50～60歲之間，48％的患者年齡超過60歲。
大約有l／3的人體內的抗FⅧ自身抗體能自行消失，但大多數情況下，它可以在體內潛伏數年直至引發嚴重的危及生命的出血。雖然，已有幾種療法可以稍減少這種自身抗體的產生，但是，總體而言療效不夠理想。
1．定義 FⅧ是參與凝血旁路途徑中一種至關重要的糖蛋白。在沒有磷脂和鈣離子的參與下，它和凝血因子Xa（FXa）可以共同作用于·FX的酵解過程。缺乏FⅧ或其完整分子將會導致諸如血友病A（一種僅發生于男性中的X一聯疾病，且概率為l／10 000）等出血性疾病的產生。
2．特性 FⅧ有兩種形式，天然型和基因重組型，而且普通的凝血分析和染色分析很難區分出這兩種類型分子。由于基因重組型分子是全長的，而天然型分子為其片段，研究者推測它們會結合不同的自身抗體，所以免疫分析法有望能區分這兩種類型分子。
天然型FⅧ分子是一含2 332氨基酸的單一的多肽鏈，其全部氨基酸序列已測定。通過克隆FⅧ并表達于哺育動物細胞中研究發現，其分子中有一包含2351個氨基酸單鏈前體的開放閱讀框，而且此結構中又有19個氨基酸單肽可以異位到胞質內質網上，并進行糖基化加工。一個FⅧ分子糖基化zui大程度可達到330kd／MW。
FⅧ分子有A、B、C三個區。其中A區有兩個部分：A1（1～329氨基酸）和A2（380～711氨基酸），它們被一在功能上*的酸性區域所分隔。A1、A2組成了FⅧ的重鏈（92kD／MW）。而輕鏈主要由A3（1649-2091氨基酸）、C1和C2組成（80kD／MW）。重鏈和輕鏈的連接區為B區（含948氨基酸，且包含80％的糖基化位點），從而因B區的構成不同，產生兩種不同類型的內源性分子。一種構型是A片段的3倍，包含30％的序列相似性。另一種構型是C片段的兩倍，含有羧基末端。因此，整個FⅧ分子結構是一線性構型，即A1-A2-B-A3-C1-C2。由于B區對于FⅧ分子功能是可有可無的，所以一些截短的FⅧ分子在結構上*去除B區或用一合成肽部分取代B區。
循環型FⅧ是異二聚體形式，它可以通過蛋白酶水解其前體而獲得。FⅧ的三個主要酶解位點對其活性而言是至關重要的：位于A1和A2區之間的酸性區域；位于A2區的羧基末端；位于B區和A3區連接點的輕鏈酸性區的羧基末端。因此，循環中存在的FⅧ的活性形式一異三聚體。其可以進一步被凝血酶、FXa、活性蛋白C水解而滅活。這些FⅧ分子的不同活性形式能夠影響其與特異性抗體的結合。
3．來源 天然型FⅧ分子由肝臟產生。基因重組型FⅧ則是通過用全長或部分的DNA表達載體轉染中國倉鼠細胞（CHO）或幼鼠腎臟細胞而產生。
4．純化 先對獻血者的血漿進行冷沉淀得到FⅧ樣品，再經過過濾、離子交換或親和層析、免疫親和層析、染色分析等一系列方法除去雜質蛋白。其中免疫親和層析法是將含FⅧ的冷沉淀物經過一預先交聯抗FⅧ的鼠單克隆抗體或VWF的交換柱，將其結合物洗脫后，再經過一離子交換柱以除去鼠免疫球蛋白雜質