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免疫熒光技術(IFT)診斷禽流感

閱讀:397          發布時間:2010-12-30

  免疫熒光技術就是熒光抗體技術(FAT)。IFTzui早用于病毒的鑒定和定位病毒感染細胞中特異性抗原,主要是核內熒光。用M1抗原的熒光抗體主要出現胞質熒光,核內也有部分熒光。

 
    IFT早在1961年就開始用于人類流感的快速診斷,1984年賓夕法尼亞州暴發禽流感時Skeeles將IFT用于AIV的檢測。用于禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法,即在組織觸片上直接染色、以熒光顯微鏡檢查熒光。一種AIV的熒光抗體可用來檢測不同亞型的其他病毒。IFT用于禽流感的診斷具有快速、簡便和敏感性好的特點,而且檢測成本費用相對較低,其敏感度與病毒的分離鑒定相當,有時高于用雞胚進行的病毒分離。但是需要注意的是如何避免和降低標本中出現的假陽性(即非特異性熒光)問題。
 
    對一株雜交瘤細胞分泌的流感病毒的單克隆抗體進行檢測時,發現間接固相免疫熒光技術的敏感性比HI高40~150倍。間接免疫熒光技術也可以用來檢測核蛋白(N尸)和基質蛋白(M1)抗原與抗體的反應,其敏感性很高。該反應對抗原制備要求較高,需用非離子型去污劑對純化的病毒粒進行裂解。
 
    由于單克隆抗體的問世,大大提高了免疫熒光測定的效果。免疫熒光用于禽流感的診斷具有快速(2h之內)、特異和敏感性高的特點,但是其不能鑒別HA和NA亞型,而且需要特殊的設備(熒光顯微鏡),且工作人員需具有一定的經驗,所以在基層檢測單位推廣應用具有一定的局限性。

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