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藻紅蛋白作為熒光標(biāo)記物具有的優(yōu)點
閱讀：2911 發(fā)布時間：2011-1-8 藻紅蛋白或稱藻膽蛋白是一種來源于藻青菌（Cyanobacteria）和真核菌類相當(dāng)穩(wěn)定的具有很強溶解性的熒光蛋白。這些蛋白質(zhì)含有共價連接的四吡咯基團(tuán)（tetrapyrolegroup），其生物學(xué)作用是聚集光，通過熒光共振能源傳遞轉(zhuǎn)化成一對特殊的葉綠素分子，定位在光合反應(yīng)中心。
因為具有光收集功能，藻紅蛋白的光吸收和發(fā)射熒光zui大，而內(nèi)部能量傳遞或外界pH值或離子組成對熒光猝滅影響降低到zui小。藻紅蛋白利用共價鍵結(jié)合的形式與抗體免疫球蛋白或其他蛋白質(zhì)結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合。
應(yīng)用其復(fù)合物進(jìn)行免疫熒光組織化學(xué)、流式細(xì)胞儀和FISH的檢測，對抗原或DNA、RNA進(jìn)行定量和定性分析，也是雙重標(biāo)記或多重標(biāo)記的熒光蛋白。
藻紅蛋白作為熒光標(biāo)記物具有以下優(yōu)點。
①具有強的長波長激發(fā)和發(fā)射熒光，可避免來自其他生物材料熒光的干擾；
②Stokes移位相當(dāng)大，具*的發(fā)射量子產(chǎn)率；
③熒光不被外部試劑猝滅，通過與蛋白質(zhì)主鏈的共價結(jié)合, 熒光基團(tuán)可被保護(hù).
④具有非常高的水溶性；
⑤有明確分子質(zhì)量的齊性結(jié)構(gòu)（homogeneousstructure）；
⑥與許多生物學(xué)或合成材料的多位點穩(wěn)定交聯(lián)。
藻紅蛋白可分為D—藻紅蛋白（phycoerythin B；B-PE）、R—藻紅蛋白（R-PE）和異位（或別）藻藍(lán)蛋白（allophycocyamin；APC）。
（一）藻紅蛋白的光譜特點
各型藻紅蛋白的光量子產(chǎn)率高達(dá)o．98，消光系數(shù)高達(dá)2．4X106cm-1·m01．L-1。以lmol為基準(zhǔn)，在可比較的波長，熒光產(chǎn)率等于至少30個未猝滅的熒光黃分子或100個羅丹明分子的熒光產(chǎn)率。
（二）藻紅蛋白的應(yīng)用
各型藻紅蛋白均有商品化產(chǎn)品，例如二抗標(biāo)記的B-PE、R-PE和APC，生物素化的B—PE、R-PE和APC，親和素標(biāo)記的B-PE、R-PE和APC產(chǎn)品。其敏感性APCzui高，其結(jié)合物的穩(wěn)定性B-PE比R-PE更好，但R-PE結(jié)合物的穩(wěn)定性可通過加入1—丙基沒食子酸鹽（propyl gallate）而增強。可與其他綠色熒光素標(biāo)記物進(jìn)行雙重免疫熒光組化標(biāo)記。