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液相色譜儀在使用中常見問題及解決方法

液相色譜儀作為一種高精密儀器，如果在使用過程中操作不當的話,就容易導致一些問題，其中常見的就是柱壓問題、漂移問題。

柱壓問題

柱壓問題是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定并不是指壓力值穩定于一個恒定值，而是指壓力波動范圍在345kPa以內（在使用梯度洗脫時，柱壓平穩、緩慢的變化是允許的）。壓力過高、過低都屬于柱壓問題。

壓力過高

這是液相色譜儀在使用中常見的問題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的情況。此時，我們應該分段進行檢查。

①首先斷開真空泵的入口處，此時EK管里充滿液體，使EK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡0.5h，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，再檢查。

②打開Purge閥，使流動相不經過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾頭堵塞。處理方法：將過濾頭取出，用10%的異丙醇超聲30min。如果壓力降至690kPa以下，過濾頭正常，再檢查。

③把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常；如果是一些強保留的物質導致堵塞，則要用比現在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不慎，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。 

壓力過低

壓力過低的現象一般是由于系統泄漏，處理方法：尋找各個接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。當然還有一個原因就是泵里進了空氣，但此時表現的往往是壓力不穩，忽高忽低，更嚴重一點會導致泵無法吸進液體。處理方法：打開Purge閥，用3~5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。