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木瓜蛋白酶的提取方法

閱讀:2961      發布時間:2016-4-16
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木瓜蛋白酶(Papain)簡稱木瓜酶,又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果實中的乳汁,采用現代生物工程技術提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、醫藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革 和紡織等行業;以未成熟的番木瓜乳液為原料,經過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。
木瓜蛋白酶的提取方法:(僅供參考)
由木瓜的未成熟果實,經提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業上以粗制品的應用為主。木瓜蛋白酶韻生產方法有三種,分別是直接熱風烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。
直接烘干
生產方法較簡單、快速,但生產出來的成品只是粗酶,雜質多、色澤差且微生物超標,酶活力也較低,只有60萬~80萬單位/g。多為個體工廠采用,已不能滿足國內食品質量衛生安全等。
噴霧干燥
此法是先通過離心去除部分雜質后再進行噴霧干燥,所生產出的成品酶活力相對高,達到100萬單位/g左右,雜質相對也較少,色澤相對也較白。但產品噴霧時容易粘壁,酶活損失較大,水溶性相對也較差,而且酶活穩定性也較差。
膜分離法
該生產方法不但避免了以上兩種方法的缺點,且生產過程衛生安全,收率也高,所生產的成品酶活損失小,酶活力一般可達到280萬~350萬單位/g,高可達400萬單位/g,且酶活穩定性好,純度高,色澤潔白,細菌數低,嚴格操作可達到醫藥。
其提取工藝條件為超聲波功率300W,超聲處理時間200s,果漿質量分數30%;經超聲波強化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;該酶在40℃以下,pH為5.4~6.0時酶活力相對穩定;EDTA、Cys和維生素C對酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對酶活力的影響不大。
木瓜蛋白酶的分離純化工藝:采用初步采集處理,20%、40%硫酸銨分級沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶。可獲得比活為1184U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純度達到99.31%,為高純度的木瓜蛋白酶。
北京索萊寶科技有限公司是一家集產品研發、生產、銷售、服務于一體的高科技生物企業。產品主要涵蓋生化試劑、分子生物學試劑、細胞培養、免疫學產品及實驗耗材等。木瓜蛋白酶為索萊寶自產產品,其貨號為G8430。木瓜蛋白酶為乳白色微黃色粉末,具有木瓜*的氣味,稍具有吸濕性。水解蛋白質能力強,但幾乎不能分解蛋白胨,易溶于水,甘油,不溶于一般的有機溶劑,耐熱性強。

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