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試劑二：臨用前加入5 mL試劑一充分溶解備用；用不完的試劑2-8℃保存兩周。

標準品：10 mg無水*萄糖。臨用前加入1 mL試劑一溶解，制備10 mg/mL葡萄糖標準液備用，2-8℃保存兩周。

取兩管0.02g林土，測定管加入試劑二160μL、甲苯4μL，對照管加入試劑一160μL、甲苯4μL，37℃準確水浴1h后，煮沸10min，離心取上清稀釋5倍，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.127-0.074=0.053，帶入標準曲線y=3.6555x-0.1459，計算x=0.05441，計算酶活得：S-NI（U/g 土樣）=3.84×x÷W ×5（稀釋倍數）=3.84×0.05441÷0.02×5（稀釋倍數）=52.2336 U/g 土樣。

取兩管0.02g土樣，測定管加入試劑二160μL、甲苯4μL，對照管加入試劑一160μL、甲苯4μL，37℃準確水浴1h后，煮沸10min，離心取上清稀釋5倍，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.115-0.068=0.047，帶入標準曲線y=3.6555x-0.1459，計算x=0.05277，計算酶活得：S-NI（U/g 土樣）=3.84×x÷W ×5（稀釋倍數）=3.84×0.05277÷0.02×5（稀釋倍數）=50.6592 U/g 土樣。