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β-半乳糖苷酶（β-GAL）測試盒 可見分光光度法
貨號：BC2580
規(guī)格：50管/24樣
測試方法：可見分光光度法
測定意義：
β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量，還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。
測定原理：
β-GAL分解對-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL活性。
自備用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
產品內容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入5mL 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二：液體15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體80mL×1 瓶，4℃保存。
標準液：液體1ml×1支，4℃保存，10μmol/ml對硝基苯酚溶液。
操作步驟：
一、 粗酶液提取：
1、 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
二、 測定步驟：
1、 分光光度計預熱30min 以上，調節(jié)波長400nm，蒸餾水調零。
試劑名稱（μL） | 測定管 | 對照管 | 標準管 |
試劑一 | 200 |
|
|
蒸餾水 |
| 200 |
|
試劑二 | 250 | 250 |
|
樣本 | 50 | 50 |
|
迅速混勻，放入37℃準確水浴30min | |||
標準液 |
|
| 500 |
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混勻，400nm 處測定吸光值A，計算ΔA=A 測定-A 對照。每個測定管需設一個對照管。
三、 β-GAL 活性計算：
根據標準管的吸光度（x）和濃度（y，nmol/ml）建立標準曲線，將△A帶入標準曲線中，計算樣品生成的產物量（nmol/ml）。
（1） 按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg 組織蛋白每小時產生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y×V 反總)÷(V 樣×Cpr)÷T
=20×y÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA 蛋白質含量測定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g 組織每小時產生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /g 鮮重)＝(y×V 反總)÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T
=20×y ÷W
（3） 按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1 萬個細菌或細胞每小時產生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /104 cell)= (y×V 反總)÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T
=0.04×y
Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；V 反總：反應體系總體積，0.5mL；V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，g； 500：細胞或細菌總數，500 萬；T：反應時間，0.5h。
β-半乳糖苷酶（β-GAL）測試盒 可見分光光度法訂購說明：
1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。
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β-半乳糖苷酶（β-GAL）測試盒 可見分光光度法運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。
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