糖原含量檢測試劑盒 微量法

產品名稱: 糖原含量檢測試劑盒 微量法

產品英文名: Micro Glucogen Content Assay Kit

產品貨號：BC0345     產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規格：100管/96樣         產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：340
庫存狀態：現貨                          
關鍵字:   糖原檢測試劑盒|糖原含量檢測試劑盒|糖原|試劑盒

簡要介紹：
糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖，是糖的主要的儲存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度，當血糖升高時可在肝臟合成糖原，血糖降低時，肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此，肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。

產品詳細描述
產品內容：
    提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
    試劑一：0.1mg/mL的葡萄糖標準液10mL×1瓶，4℃保存；
    試劑二：粉劑×1瓶， 4℃保存；
產品說明：
糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖，是糖的主要的儲存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度，當血糖升高時可在肝臟合成糖原，血糖降低時，肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此，肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。
測定原理：蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原，在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量比色皿/96 孔板、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

• 糖原提取：

1﹑細胞或細菌：收集500~1000 萬細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；加入0.75mL 提取液超聲波破碎細菌或細胞（功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；轉移10mL 試管中，置于沸水浴中煮沸20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min 振搖試管1 次，使充分混勻；取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5mL，混勻，待測。
2﹑組織：稱取0.1~0.2g 樣品，置于10mL試管中；加入0.75mL提取液，置于沸水浴中煮沸20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min 振搖試管1 次，使充分混勻；待組織全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5mL，混勻，待測。

• 步驟和加樣表
• 分光光度計或酶標儀預熱30min 以上，調節波長620nm，蒸餾水調零。調節水浴鍋95℃。
• 在試劑二中倒入6mL 蒸餾水，緩慢倒入24mL 濃硫酸，充分溶解混勻后使用。4℃有效期一周。
• 加樣表（在EP 管中反應）：

混勻，置沸水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，于620nm 波長處，分別讀取空白管、標準管和測定管吸光度，分別記為A1、A2 和A3。
注意：1、空白管和標準管只要測一次。
      2、如果A3-A1 大于2，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計算公式中乘以相應的稀釋倍數。

• 糖原含量的計算：
• 按照樣本質量計算

糖原（mg/g 鮮重）=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷W

1. 按照蛋白質含量計算

糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr
3、按照細菌或細胞數量計算
糖原（mg/10⁴ cell）=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細菌或細胞數量×V1÷V2)
                 = 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷細菌或細胞數量
    1.11：是此法測得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數，即111μg 糖原用蒽酮試劑顯色相當于100μg 葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色；C 標準：標準管濃度，0.1mg/mL；V1：加入反應體系中糖原提取液體積，0.25mL；V2：提取液體積，5mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；細菌或細胞數量：以10⁴為單位，萬個。


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