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2020-6-19 閱讀(3505)
生物安全柜的消毒
生物安全柜的消毒
1 消毒措施每日進行實驗前開啟生物安全柜風機, 柜體內外噴灑75%*酒精, 然后開啟紫外燈照射消毒 30 m i n。試驗結束后清理操作臺面, 柜體內外噴灑 75%*酒精, 開啟紫外燈照射 30 m i n。
2 消毒效果檢測采樣時機選擇在消毒前、 消毒后和工作之后進行。用無菌棉拭插入裝有 10 mL無菌生理鹽水的試管內浸透棉拭,在生物安全柜操作臺面的中央及前后左右側壁 5個區域作涂抹采樣 5次, 然后將采樣棉拭置于試管內鹽水中; 用同樣方法對安全柜前后左右四壁進行采樣;另設 1支無菌棉拭不作任何采樣, 置于 1 0 mL無菌生理鹽水試管內作對照。柜內空氣采樣用一支 10 m l彈頭無菌離心管, 開蓋置于生物安全柜內中央區域 2h后取出,直接加入 DNA 提取液震蕩后進行裂解擴增檢測。對所采集樣本進行 H BV - DNA 熒光定量 PCR 檢測, 試劑為達安公司試劑盒, ABI- 7000熒光定量 PCR儀, 嚴格按試劑盒說明書操作。出現擴增即為陽性, 提示存在污染; 未出現擴增即為陰性, 說明消毒有效。
有檢驗學者提出, 在臨床 PCR 檢驗及使用基因擴增技術的科學研究中一定要有一個無基因概念。如何能保證一個#無基因∃潔凈空間以進行 PCR 檢驗, 生物安全柜對空氣的高效濾過凈化作用可能是*佳選擇。但因柜內空間狹小,一旦發生污染更難于清除,所以應注意生物安全柜的正確操作和日常消毒維護。本實驗室所采取消毒步驟, 實驗前
后運行生物安全柜風機 30 m in , 生物安全柜的高效過濾系統對直徑為 0.3微米顆粒過濾效率可達 99%; 噴灑 75 % 酒精會使菌體蛋白質凝固變性; 紫外燈照射 30 m i n能夠破壞微生物機體細胞中的 DNA (脫氧核糖核酸 )或 RNA (核糖核酸 )的分子結構, 三者聯合應用作為生物安全柜的日常消毒維護措施可以消除污染的基因物質。在未發生標本漏濺、 生物危害溢出等意外情況下, 其消毒效果可以得到保證, 而且沒有腐蝕性和刺激性等缺點 操作簡便 易于執行。
