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CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 活動* 日期2017年3月20日-2017年7月20日
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 價格 | 活動價 | 品牌 |
GK3607-500T | CCK-8 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 | 500T | 620.00 | 372.00 | Genview |
CCK-8試劑盒可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。 Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8,是一種廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
CCK-8基于WST-8,與MTT類似,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原
生成橙黃色的formazan。對于同樣的細胞,顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。
使用酶標儀在450nm波長處測定OD值,間接反映活細胞數量。
酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。CCK-8對細胞無明顯毒性。加入CCK-8顯色后,
可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到*測定時間。
CCK-8優勢:
1、使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;
2、能快速檢測;
3、檢測靈敏度很高;
4、重復性優于MTT 法;
5、對細胞毒性小;
6、即用型溶液,無需配置,使用方便。
注意事項
1、使用標準96孔板時,通常細胞增殖實驗每孔加入2,000個細胞/100ul培養基,細胞毒性實驗每孔加入
5,000個細胞/100ul培養基(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等因素決定。
按照實驗需要,進行培養并給予0-10ul特定的藥物刺激。
2、酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾,可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。
3、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養基顏色接近,不注意的話容易產生漏加或多加。
4、CCK-8可以檢測大腸桿菌,但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染,
以免影響結果
5、當在培養箱內培養時,培養板zui外一圈的孔容易干燥揮發,導致體積不準確而增加誤差。一般情況下,
zui外一圈的孔只加培養基,不作為測定孔用。
6、在培養基中加入CCK-8,培養一定的時間,測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時,
還應考慮藥物的吸收,可在加入藥物的培養基中加入CCK-8,培養一定的時間,測定450nm的吸光度作為空白對照。
7、金屬對CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、 銅會5%、15%、90%的抑制顯色反應,
使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會*抑制顯色反應。
8、部分懸浮細胞由于染色比較困難,一般需要增加細胞數量并延長培養時間。
MTT和CCK-8細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒可以滿足常規的細胞增殖或細胞毒性的檢測,主要缺點是形成的formazan
水溶性很差,需要額外的步驟溶解formazan。
如果對細胞增殖或細胞毒性的檢測要求靈敏度非常高,并且希望非常便捷,在研究經費許可的條件下,
建議選擇使用Cell Counting Kit-8。
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