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如何選擇BTX轉基因儀

時間:2021/1/13閱讀:1251
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1、確定目標對象:也就是你所有轉的目的物是什么東西?
細胞系和細胞類型
細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等
細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,Trypanosome,E coli等

2、其次確定目的
目的包括:轉染 轉化 電整合 電插入 活體/卵的應用 核移植和克隆 細胞融合

然后根據這些來確定該選擇什么類型的儀器。
1、 某位老師使用化學法轉化大腸桿菌E.coli。他希望構建cDNA文庫,但是不能得到好的轉化效率。他以后還想做哺乳動物細胞。如何來選擇儀器:
選擇方案:ECM 399將是較好的選擇,這儀器用來轉化E.coli效果十分理想,同時操作簡單。如果有足夠的預算,可以選擇ECM 630, 這樣更符合他現在和將來的需求。

2、某位老師想要進行一些雞胚的研究工作,他們希望轉染雞的眼睛,以便研究視覺膜的發育過程。他對卵的基因傳遞有一些了解。
選擇方案:完成這個轉染過程需要 ECM 830和活體電極Genetrodes。由于目標區域很小,他需要小的長的genetrode。方波適合動物體的活體轉基因,同時針形的電極是卵的轉基因的選。

3、遺傳研究中心希望開展某種疾病的基因治療,首先從小動物例如小鼠,以后要在狗、豬等動物體開展。客戶希望用基因槍的方法。但是覺得條件不易控制。
選擇方案:基因槍不是理想的活體轉基因的方法。基因槍容易傷害哺乳動物的組織,同時條件可控性差,DNA的轉移效果不理想。推薦使用ECM 830 和2 Needle Array 用于小動物研究,對于大的動物研究的話還需配 caliper electrode。

4、Dr. Mendle使用agrobacteria來轉化煙草的原生質體。他在尋找快速在完整的植株上完成轉基因的方法。此時如何選擇?
選擇方案:ECM 630和特殊電極。電極的選擇需要根據植物轉基因的部位。一般有三種電極可以選擇Tweezertrode、 Caliper Electrode、 Needle Arrays.根據他所轉的植物體大小,硬度等進行

5、Dr. Hofmann正使用脂質體方法轉染原代神經細胞,但是結果差強人意,僅得到1%的轉染效率。但是他不希望使用電轉,因為怕殺死細胞。這些希望不能被胰蛋白酶消化(會引起其他變化)所以他不能使用樣品杯。給怎么辦。
選擇方案:推薦使用ECM 830 和petri dish 電極或者epizap電極。這樣可以用溫和的方法完成原位轉基因。

6、 Dr. Bloom希望你給他推薦一款融合儀。他過去使用化學的方法來進行的。怎么來推薦。

選擇方案:如果費用允許, ECM 2001是的選擇。它提供交流波能排列細胞,可以完成所有的細胞融合試驗。如果費用不足的話,ECM830也可以完成核移植的工作,在融合時需要將兩個細胞進行排列,或者細胞的濃度足夠大。

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