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免疫染色法檢定蛋白質

2013-1-16  閱讀(1117)

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方法步驟:
1) 尿素洗過夜的轉印紙再以10 mL PBST 洗三次,每次約10 min,均在上述方形培養皿中進行。
2) 轉印紙放在明膠NET 溶液中反應,置室溫中反應1 h。一般使用方形培養皿當容器,但亦可裝入塑料袋中反應,較節省試劑用量。
3) 反應后,以PBST 浸洗二次。
4) 把轉印紙放在抗體溶液中反應,置室溫反應1 h。
5) 反應后以PBST 洗三次,改用酶聯體反應,在室溫下反應1 h。
6) 以PBST 洗四至五次,注意容器也要洗干凈。
7) 加入DAB 基質溶液約10 mL 呈色,盡量避光,并且不時搖動呈色液。
8) 數分鐘內可呈色,在背景加深前倒去DAB,以水沖過數次后晾干。

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