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技術(shù)文章

人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程必知小知識

閱讀:359          發(fā)布時(shí)間:2017-9-22

人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程必知小知識:
① 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
② 若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)。
③ 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
④ 酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測,如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng),保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結(jié)標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
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