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大鼠ELISA試劑盒經驗技術也是很重要的，常見的技術指南
閱讀：480 發布時間：2017-11-29大鼠ELISA試劑盒經驗技術也是很重要的，常見的技術指南：
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體對。
2、實驗中為了確定信號和zui低背景應將捕獲抗體和檢測抗體在預實驗中進行彼此相抗的滴定。
3、標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節，在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子，根據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋。
5、為了優化靈敏度，建議孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠核轉錄因子-κB（NF-κB）水平。用純化的大鼠核轉錄因子-κB（NF-κB）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入核轉錄因子-κB（NF-κB），再與HRP標記的核轉錄因子-κB（NF-κB）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉錄因子-κB（NF-κB）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠核轉錄因子-κB（NF-κB）的含量。
實驗過程必知小知識：
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測，如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應，保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
⑧ 反復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。
大鼠ELISA試劑盒B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒 ，英文名： Bcl-xl ELISA Kit
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apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 ，英文名： AP12 ELISA Kit
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