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金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基尋找一種既能適合細(xì)胞生長(zhǎng)又避免添加血清的培養(yǎng)基迫在眉睫,無(wú)血清培養(yǎng)應(yīng)運(yùn)而生。

目的:探索一種適用于C3A細(xì)胞生長(zhǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,為肝細(xì)胞用于臨床治療以及生物人工肝走入臨床奠定基礎(chǔ)。

方法:分別用無(wú)血清培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基和基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)C3A細(xì)胞,觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和活力曲線,全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定上清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法檢測(cè)白蛋白分泌量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因水平的變化情況。

結(jié)果與結(jié)論:3種培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)良好,無(wú)血清培養(yǎng)基組與*培養(yǎng)基組細(xì)胞密度在培養(yǎng)周期內(nèi),除第7天以外差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。培養(yǎng)第4~7天,其他兩組明顯高于基礎(chǔ)培養(yǎng)基組(P0.05);無(wú)血清培養(yǎng)基尿素合成水平*培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基(P0.05)。Real-time qPCR顯示,無(wú)血清培養(yǎng)基組相對(duì)于*培養(yǎng)基組僅CK18、CK19和HNF4α基因表達(dá)量下降(P0.05)。

說(shuō)明實(shí)驗(yàn)研制了一種適合于肝細(xì)胞(C3A)生長(zhǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,與傳統(tǒng)血清培養(yǎng)能達(dá)到同樣的效果。