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技術文章

人胚腎細胞使用注意方法

閱讀:249          發布時間:2021-3-23

人胚腎細胞使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1、吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2、 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3、 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4、待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

人胚腎細胞注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件;建議使用派瑞金的*培養基。

4. 建議收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態。

5. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。

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