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技術(shù)文章

發(fā)酵培養(yǎng)基pH值影響有哪些

閱讀:1619          發(fā)布時間:2022-3-23

         發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值,對微生物生長具有非常明顯的影響,也是影響發(fā)酵過程中各種酶活的重要因素。pH值對微生物的生長繁殖和產(chǎn)物合成的影響有以下幾個方面:

①影響酶的活性,當(dāng)pH值抑制菌體中某些酶的活性時,會阻礙菌體的新陳代謝;

②影響微生物細胞膜所帶電荷的狀態(tài),改變細胞膜的通透性,影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄;

③影響培養(yǎng)基中某些組分的解離,進而微生物對這些成分的吸收;

④pH值不同,往往引起菌體代謝過程的不同,使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。

  培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的代謝,是引起pH值變化的主要原因,發(fā)酵液pH值的變化乃是菌體代謝的綜合效果。由于pH值不當(dāng),可能嚴(yán)重影響菌體的生長和產(chǎn)物的合成,因此對微生物發(fā)酵來說有各自的最適生長pH值和最適pH值。各種不同的微生物,對pH值的要求不同。多數(shù)微生物生長都有最適pH值范圍及其變化的上下限:上限都在8.5左右,超過此上限,微生物將無法忍受而自溶;下限以酵母為*低(2.5)。但菌體內(nèi)的pH值一般認為是中性附近。pH值對產(chǎn)物的合成有明顯的影響,因為菌體生長和產(chǎn)物合成都是酶反應(yīng)的結(jié)果,僅僅是酶的種類不同而已,因此代謝產(chǎn)物的合成也有自己最適的pH值范圍,如合成青霉素的最適pH值范圍為6.5~6.8。這兩種pH值的范圍對發(fā)酵控制來說都是很重要的參數(shù)。另外,pH值還會影響某些霉菌的形態(tài)。

  一般認為,細胞內(nèi)的H+或OH-能影響酶蛋白的解離度和電荷情況,改變酶的結(jié)構(gòu)和功能,引起酶活性的改變。但培養(yǎng)基的H+或OH-并不是直接作用在胞內(nèi)酶蛋白上,而是首先作用在胞外的弱酸(或弱堿)上,使之成為易于透過細胞膜的分子狀態(tài)的弱酸(或弱堿),它們進入細胞后,再行解離,產(chǎn)生H+或OH-,改變胞內(nèi)原先存在的中性狀態(tài),進而影響酶的結(jié)構(gòu)和活性。所以培養(yǎng)基中H+或OH-是通過間接作用來產(chǎn)生影響的。pH值還影響菌體對基質(zhì)的利用速率和細胞的結(jié)構(gòu),影響菌體的生長和產(chǎn)物的合成。Collnig等人發(fā)現(xiàn)產(chǎn)黃曲霉的細胞壁的厚度就隨pH值的增加而減小:其菌絲直徑在pH6.0時為2~3μm;pH7.4時為2~18μm,并呈膨脹酵母狀;pH值下降后菌絲形態(tài)又會恢復(fù)正常。pH值還影響菌體細胞膜的電荷狀況,引起膜透性發(fā)生改變,因而影響菌體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的形成等。

  如同溫度對發(fā)酵影響一樣,pH值對產(chǎn)物穩(wěn)定性也有影響。如在β-內(nèi)酰胺抗生素沙納霉素(thienamycin)的發(fā)酵中,考察pH值對產(chǎn)物生物合成的影響時,發(fā)現(xiàn)pH6.7~7.5之間,抗生素的產(chǎn)量相近,高于或低于這個范圍,合成就受到抑制。在這個pH值范圍內(nèi),沙納霉素的穩(wěn)定性未受到嚴(yán)重影響,半衰期也無大的變化;但pH>7.5時,穩(wěn)定性下降,半衰期縮短,發(fā)酵單位也下降。青霉素在堿性條件下發(fā)酵單位低,也與青霉素的穩(wěn)定性有關(guān)。

  由于pH值的高低對菌體生長和產(chǎn)物的合成產(chǎn)生明顯的影響,所以在工業(yè)發(fā)酵中,維持最適pH值已成為成敗的關(guān)鍵因素之一。

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