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技術(shù)文章

撫生試劑-表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的測(cè)定方法

閱讀:203          發(fā)布時(shí)間:2014-5-15

表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的測(cè)定方法
 
    EGF主要來(lái)源于頒下腺。成年人許多組織中也表達(dá)EGF。人成纖維細(xì)胞、唾液腺癌細(xì)胞等也可產(chǎn)生EGF。EGF的作用沒有種屬特異性,人和小鼠的EGF對(duì)人成纖維細(xì)胞的作用相同。
 
    1.Swiss 3T3細(xì)胞增殖法
    (1)用含5%FCS的DMEM培養(yǎng)液將Swiss 3T3細(xì)胞調(diào)整成1×104/mL,接種于60mm的培養(yǎng)皿中(5mL),置37C 5%C02溫箱中培養(yǎng)4~5d,待細(xì)胞匯合后,更換上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d,此時(shí)細(xì)胞數(shù)不再增多。
    (2)分別加入200ral系列稀釋的待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品,陰性對(duì)照加培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)4d。
    (3)采用3H-TdR摻人法或比色法測(cè)定細(xì)胞增殖反應(yīng)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中EGF的含量(活性),或用誘導(dǎo)50%zui大細(xì)胞增殖的zui高稀釋度表達(dá)EGF的含量。
 
    2.BALB/c 3T3細(xì)胞增殖法
    (1)用含5%FCS的DMEM培養(yǎng)液將Swiss 3T3細(xì)胞調(diào)整成2×104/mL,接種于60mm的培養(yǎng)皿中(5mI),置37C 5%C02溫箱中培養(yǎng)5ho更換同樣培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)24h。
    (2)向培養(yǎng)物中加入100~L系列稀釋的待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品,陰性對(duì)照培養(yǎng)皿加培養(yǎng)液,培養(yǎng)16h后,同上法測(cè)定和計(jì)算EGF的含量(活性)。
Anti-AE3/SLC4A3(anion exchanger protein 3)     陰離子交換蛋白3抗體
 Anti-AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1)     脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
 Anti-α-AF/α-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase)     α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體
 Anti-AFP (Anti--Alpha Fetoprotein(AFP), for conjugation and detection)     鼠抗人甲胎蛋白抗體
 Anti-AFP(Mo Monoclonal antibody)     鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(包被)
 Anti-AFP(Human AFP Mouse Monoclonal)     鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測(cè))
 Anti-AGER/RAGE(Advanced glycosylation end product-specific receptor)     晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體
 Anti-AGEs (advanced glycosylation end products)     晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體
 Anti-Aggrecan     軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體
 Anti-Agrin     聚集蛋白抗體
 Anti-Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a)     血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗體
 Anti-Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor)      芳香烴受體抗體

 

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