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技術文章

ELISA法細胞凋亡

閱讀:124          發布時間:2015-7-13

ELISA試劑盒法細胞凋亡檢測操作步驟:

1.收集細胞,離心后,用200μl溶細胞緩沖液重新懸浮,室溫下作用30min。(培養細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣本)

2.取樣品離心后(1 000r/min,10min),吸取20μl上清液,加入鏈霉親合素包被的培養板孔中。

3.加入80μl免疫反應試劑含抗-DNA-POD、抗組蛋白-生物素及溫育緩沖液(按1︰1︰18混合),室溫下孵育2h(置搖床上,250r/min)。

4.ELISA試劑盒取上清,用300μl溫育緩沖液洗滌3次,小心移去洗滌液。

5.加入100μl底物緩沖液,室溫下孵育使顏色變化至適合(置搖床上)。

6.ELISA試劑盒盡快作比色分析(10min~20min內),用底物緩沖液作空白對照,以波長405nm,參考波長492nm進行檢測。

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