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分揀連接蛋白13(SNX13)ELISA試劑盒說明書

閱讀:126          發布時間:2014-9-18
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分揀連接蛋白13(SNX13)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用  標本:體液

分揀連接蛋白13(SNX13)ELISA試劑盒試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。

分揀連接蛋白13(SNX13)ELISA試劑盒自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

分揀連接蛋白13(SNX13)ELISA試劑盒結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

 GNRHR-Ab  大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體  規格: 48T/96T

 GnRHR  大鼠促性腺激素釋放激素受體  規格: 48T/96T

 GnRH  大鼠促性腺激素釋放激素  規格: 48T/96T

 GRH  大鼠促生長激素釋放激素  規格: 48T/96T

 ACTH  大鼠促腎上腺皮質激素  規格: 48T/96T

 CRH  大鼠促腎上皮質激素釋放激素  規格: 48T/96T

 FSH  大鼠促卵泡素  規格: 48T/96T

 TRH  大鼠促甲狀腺素釋放激素  規格: 48T/96T

 TSH  大鼠促甲狀腺素  規格: 48T/96T

 LH  大鼠促黃體激素  規格: 48T/96T

 E3  大鼠雌三醇  規格: 48T/96T

 E  大鼠雌激素  規格: 48T/96T

 ER  大鼠雌二醇受體  規格: 48T/96T

 E2  大鼠雌二醇  規格: 48T/96T

 VLA  大鼠遲現抗原  規格: 48T/96T

 SOD  大鼠超氧化物歧化酶  規格: 48T/96T

 hs-CRP  大鼠超敏C反應蛋白  規格: 48T/96T

 iFABP  大鼠腸脂肪酸結合蛋白  規格: 48T/96T

 CFH  大鼠補體因子H  規格: 48T/96T

 C  大鼠補體片斷  規格: 48T/96T

 C3a  大鼠補體片斷3a  規格: 48T/96T

 C4  大鼠補體蛋白4  規格: 48T/96T

 C3  大鼠補體蛋白3  規格: 48T/96T

 M2-PK  大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶  規格: 48T/96T

 MDA  大鼠丙二醛  規格: 48T/96T

 EGF  大鼠表皮生長因子  規格: 48T/96T

 PY  大鼠吡啶交聯物  規格: 48T/96T

 BTA  大鼠膀胱腫瘤抗原  規格: 48T/96T

 Cys-C  大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C  規格: 48T/96T

 LIFR  大鼠白血病抑制因子受體  規格: 48T/96T

 ALCAM  大鼠白細胞活化黏附因子  規格: 48T/96T

 CD44  大鼠白細胞分化抗原44  規格: 48T/96T

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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