化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：色素染色
儲存條件：室溫,避光,12個月
用途：組織二價鐵染色
注意事項：又稱滕氏藍(lán)反應(yīng)，二價鐵呈藍(lán)色,細(xì)胞核呈紅色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Lillie二價鐵染色液 | 2×50ml | FS-R6981 |
配制與標(biāo)定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
萊西氏菌屬布氏桿菌菌體蛋白抗體Human GALK2 ELISA Kit小鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒
褪色（粘質(zhì)）磷化B-Raf抗體Human GALNT4 ELISA Kit小鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒
水叢毛單胞菌磷化B-Raf抗體Human GALM ELISA Kit小鼠CD33分子(CD33)免疫試劑盒
土生隱球酵母多聚合苷激3磷化抗體Human GADD34 ELISA Kit小鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒
秀珍菇癌易感基因1抗體Human GABRG2 ELISA Kit小鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒
紫棕炭團(tuán)菌Bcl-2同源拮抗劑抗體Human GADD45A ELISA Kit小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌β3腎上腺能受體抗體Human GADD45GIP1 ELISA Kit小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)免疫試劑盒
土生克雷伯氏菌腦鈉/鈉肽抗體Human GAGE2D ELISA Kit小鼠Ca-ATP(Ca-ATPase)免疫試劑盒
馬昆德擬青霉BZW2蛋白抗體Human GAGE1 ELISA Kit小鼠B因子(BF)免疫試劑盒
布魯氏菌緩激肽B1受體抗體Human GAK ELISA Kit小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
釀酒酵母鈣激活通道蛋白α1抗體Human GAGE7 ELISA Kit小鼠B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
彎曲芽孢桿菌卵黃狀黃斑病蛋白2抗體Human GABARAPL1 ELISA Kit小鼠B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
解淀粉周培瑾氏菌絲/蘇蛋白激SAD-B抗體Human GABARAPL2 ELISA Kit小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒
可可球二孢鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體Human GALE ELISA Kit小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒
灰黃淺黃酵母腦肌激BCK抗體Human GAN ELISA Kit小鼠Apelin 免疫試劑盒
釀酒酵母β葡萄糖苷抗體Human GAPDHS ELISA Kit小鼠Apelin 13(AP13)免疫試劑盒
發(fā)光假蜜環(huán)菌(亮菌)Armillaria tabescens 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRα-內(nèi)肽試劑盒3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基
納豆芽孢桿菌Bacillus│natto 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRα肌動蛋白試劑盒25-羥基原人參二
宇佐曲霉Aspergillus│usamii 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BSα-黑色激試劑盒3-氫化去氫松苓
Lillie二價鐵染色液CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體規(guī)格： 48T
S0A9(Human S0 calcium binding protein A9/calgranulin B) ELISA Kit 人S0鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B規(guī)格： 48T
S0A8(human S0 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S0鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A規(guī)格： 48T
Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點(diǎn)1規(guī)格： 48T
PEA(Human Pseudomonas Exotoxin A) ELISA Kit 人綠膿桿jun外毒suA規(guī)格： 48T
化工儀器網(wǎng)