亞甲基藍(lán)指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞促紅生成素(EPO)試劑盒Anti-ANKRD1 Antibody銅藍(lán)蛋白抗原
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產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：氧化還原指示劑

注意事項(xiàng)：氧化態(tài)為藍(lán)色，還原態(tài)為無(wú)色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

Arthrobacterβ淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體Human HSPB7 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒

總狀毛霉錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒

新月彎孢二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human HSD17B7 ELISA Kit小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒

根瘤菌二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體Human HSD17B8 ELISA Kit小鼠甲基化(Methylase)免疫試劑盒

俏紅芝腺苷單磷脫1抗體Human HSD3B2 ELISA Kit小鼠己糖激(HK)免疫試劑盒

德沃斯氏菌屬紅蛋白Ank1抗體Human HPS6 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白受體(VLDLR)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌腺苷琥珀裂解抗體Human HPSE2 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌α1B糖蛋白抗體Human HRASLS5 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒

菜豆間座殼載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體Human HOXD4 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)免疫試劑盒

油脂酵母凋亡誘導(dǎo)因子3抗體Human HRC ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)免疫試劑盒

平菇凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體Human HRH2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒

米曲霉凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體Human HP1BP3 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒

瓶形毛殼性神經(jīng)鞘磷脂抗體Human HOXD8 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒

加米那類芽孢桿菌腺核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human HRP 2(Hepatoma-derived growth factor-related protein 2) ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒

南鼠尾桿菌肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體Human HRPT2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒

間型彎孢ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體Human HSDL2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒

腐皮鐮孢Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR白介-12受體試劑盒石蒜裂堿

豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)白介12試劑盒四氫洲防己堿

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格：AR白介12試劑盒石松靈堿
亞甲基藍(lán)指示劑AIRA(Human insulin receptor antibody) ELISA Kit  人抗胰島su受體規(guī)格： 48T

AGPA/PCA(Human gastric parietal cell antibody) ELISA Kit  人抗胃壁細(xì)胞規(guī)格： 48T

ARA(Human gastric parietal cell antibody) ELISA Kit  人抗網(wǎng)硬蛋白規(guī)格： 48T

MCV(Human mutated citrullinated vimentin antibody) ELISA Kit  人抗突變型瓜氨suan波形蛋白規(guī)格： 48T

AMA IgA(Human myelin antibody IgA) ELISA Kit  人抗髓磷脂IgA規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。