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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義：TH位于線粒體的內膜上，又稱為線粒體復合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉化，調節線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。測定原理：NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測定375nm光吸收的增加速率，來計算TH-2活性。需自備的儀器和用品：可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321137 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
右佐匹克（標準品）英文名： (R)-(?)-Mandelic acid雌激受體α抗體包裝250mg
魚腥草鈉（標準品）英文名： 1-Aminohydantoin Hydrochloride內質網Aβ相關結合蛋白抗體包裝1g
愈創甘油（標準品）英文名： 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g
愈創木磺（標準品）英文名： ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g
遠華蟾蜍精(標準品)英文名： Bradykinin雌激硫轉移抗體包裝25g
月桂（標準品）英文名： Bradykinin acetateE Tag標簽抗體包裝5g
孕三烯（標準品）英文名： α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g
扎來普（標準品）英文名： Endothelin-1, human,porcine食道癌相關基因抗體包裝5g
扎那米韋(標準品)英文名： BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g
扎托(標準品)英文名： VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質谷運載蛋白1抗體包裝1g
正己（標準品）英文名： Agarose轉錄因子E2F-1抗體包裝5g
正十九烷（標準品）英文名： PEG 400內皮轉化1抗體包裝1mg
正十五烷（標準品）英文名： Cholestyramine resin外基質蛋白1抗體包裝5mg
芝麻(標準品)英文名： Sucrose外胚層發育不良抗體包裝25g
酯蟾配基；蟾力蘇(標準品)英文名： D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標簽抗體包裝5g
伊尼奧小單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 質量規格：HPLC>98%,標準品糖化血紅蛋白A1c試劑盒3,4,5-三氧基酯;Meth
卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus 質量規格：>98%,BR糖化低密度脂蛋白試劑盒石杉堿;(-)-Huperzine A
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：HPLC>98%,標準品糖化白蛋白試劑盒楊酯;Birch-Me
轉氫酶2測試盒50管/48樣朱黃籃狀 FMOC-D-1,2,3,4-四氫-Β-咔啉-3-羧酸β2巨球蛋白Elisa
Paenibacillus durus 2,3,7,8,12,13,17,18-八乙基-21H,23H-卟吩α-烯化Elisa
解脂假絲酵母 3-氨基-2,2-二甲基-1-(草酸鹽形式）α-烯化Elisa
加德納 8-苯基辛酸胸腺表達趨化因子Elisa
長蠕孢 N-(4-溴苯基)硫脲再生胰島衍生蛋白4Elisa
褐囊蜜環 N-3-異惡唑叔丁酯p物質前提Elisa
野土地桿 5-溴-2-甲酰肼EB病包膜糖蛋白gp350抗體Elisa
釀酒酵母 4-硝基馬尿酸MG29抗體Elisa
不產色鏈霉不產色亞種 4-氨基鄰甲組釋放因子Elisa
釀酒酵母 2-溴-1,3-二-5-氟苯磷酸化肝生長因子受體Elisa
噬果膠黃桿 3--1,2,3-三羧酸map2k5Elisa
地衣芽孢桿 3-氧雜環丁烷支原體IgG抗體Elisa
康寧木霉 3-二氟甲氧基衣原體抗體IgGElisa
相思根瘤 4-甲氧基-2-乙肺炎支原體IgM抗體Elisa
膨端青霉 2,4-二羥基-3-硝基吡啶肌抗體Elisa
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