多聚賴氨酸溶液公司正在銷售的產品：人載脂蛋白A1(ApoA1)試劑盒 Anti-LPAR5 Antibody乙型肝炎e抗原
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人肌紅蛋白(MYO)

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：免疫組化

儲存條件：—20℃,避光,12個月

用途：一種粘附劑,常用于載玻片的包被

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

親和鏈霉菌磷化細絲蛋白A抗體Human MCPIP(Monocyte Chemoattractant Protein-induced Protein 1) ELISA Kit馬二(MDA)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢FMS樣酪激3配體抗體Human ZNF71 ELISA Kit馬白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒

紅細菌屬F-box富含亮重復蛋白4抗體Human ZNF600 ELISA Kit馬白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒

賴芽胞桿菌屬免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體Human ZNF611 ELISA Kit馬白介6(IL-6)免疫試劑盒

Bacillus Fcγ免疫球蛋白IgG結合蛋白抗體Human ZNF606 ELISA Kit馬白介4(IL-4/CXCL4)免疫試劑盒

假單胞菌屬磷肌結合蛋白1抗體Human ZNF597 ELISA Kit馬白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化成纖維生長因子受體3抗體Human ZNF711 ELISA Kit馬白蛋白(Albumin)免疫試劑盒

球孢白僵菌叉頭相關結構域包含蛋白1抗體Human ZNF622 ELISA Kit馬β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒

盤多毛孢串珠狀纖維結構蛋白1抗體Human ZNF658 ELISA Kit馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒

松口蘑纖維調節(jié)蛋白抗體Human ZNF645 ELISA Kit馬C反應蛋白(CRP/PTX1)免疫試劑盒

干環(huán)褶孔菌磷化FANCD2抗體Human ZNF649 ELISA Kit馬17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

稻離蠕孢范可貧血相關蛋白E抗體Human ZNF419 ELISA Kit雞

釀酒酵母范可貧血相關蛋白M抗體Human ZNF549 ELISA Kit雞轉錄因子AP-1(AP-1)免疫試劑盒

昆明鏈霉菌軟骨Ezrin樣蛋白抗體Human ZNF443 ELISA Kit雞轉化生長因子β3(TGFB3)免疫試劑盒

香菇(林研1號)慢性粒白血病33抗體Human ZNF557 ELISA Kit雞轉化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

中間普氏菌白血病病C亞類受體蛋白FLVCR抗體Human ZNF446 ELISA Kit雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：分析標準品,98.6%羅漢果皂苷IVa

腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus 質量規(guī)格：100μg/ml,u=4%3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[

香菇Lentinula│edodes 質量規(guī)格：10μg/ml,u=6%白頭翁皂苷B
多聚賴氨酸溶液Human Soluble protein-0B,S-0B ELISA Kit  人S0B蛋白規(guī)格： 48T

Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit   人巨噬細胞炎性蛋白2規(guī)格： 48T

Human gelson ELISA Kit  人凝膠原蛋白規(guī)格： 48T

Human talin ELISA Kit  人踝蛋白規(guī)格： 48T

Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit  人角化細胞內分泌因子規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。