詳細介紹
商品介紹:
測定意義: 超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。 測定原理: AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。 需自備的儀器和用品: 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS632179 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)英文名:8-OHdG ELISA Kit1號染色體開放閱讀框194抗體包裝1g
70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)英文名:HSPA8 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框198抗體包裝25g
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)英文名:HSPA5 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)英文名:HSPA1A ELISA Kit1號染色體開放閱讀框216抗體包裝1g
60kD熱休克蛋白(HSPD1)英文名:HSPD1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框43抗體包裝25g
5羥色胺轉運蛋白(SERT)英文名:SERT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框50抗體包裝5g
5-羥色胺(5-HT)英文名:5-HT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
5-羥基乙(5-HIAA)英文名:5-HIAA ELISA Kit1號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)英文名:NUP50 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框54抗體包裝1ml
27kDa熱休克蛋白(HSPB1)英文名:HSPB1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
25-羥基維生D3(HVD3)英文名:HVD3 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框56抗體包裝100g
25kDa突觸關聯蛋白(SNAP25)英文名:SNAP25 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)英文名:NUP210 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框64抗體包裝100g
20S-蛋白體(20S-PSM)英文名:20S-PSM ELISA Kit1號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
2',5'-寡腺苷合成1(OAS1)英文名:OAS1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框77抗體包裝500g
馬氏副球菌Paracoccus│marcusii 質量規格:>99%,BR,三合物胰脂肪試劑盒異槲皮苷;Isoquercitrin
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規格:HPLC>98%,標準品胰抑制試劑盒異鼠李-3-O-新;Isorha
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:>99%,BR胰腺癌標志物CA242 原蘇木B;Protosappanin
超氧陰離子清除能力測試盒50管/48樣枯斑擬盤多毛孢 3--4-甲酰苯酸,95%磷酸二酯2Elisa
硬水黃桿 1-氟吡啶四氟酸鹽過氧化物Elisa
熱纖梭* ,4,6-基吡啶三氟磺酸鹽RecQ解旋樣蛋白5Elisa
肺形側耳 (R)-3-氨基四鹽酸鹽載脂蛋白AElisa
纖維鏈霉 乙二二硫代縮氨基脲脂蛋白AElisa
茄鏈格孢 N-Boc-L-環己基甘氨表皮調節Elisa
叢毛單胞 1-甲基吲唑-4-羧酸Derlin1蛋白Elisa
戊糖片球 Boc-1-氨基環烷甲血清運鐵蛋白受體Elisa
布魯氏 生物Ⅵ型 戊酸鈉原鈣黏1Elisa
變紫青霉 2--3-甲基-4-(甲基磺酰)雌酮Elisa
尖孢鐮刀胡麻專化型 5-氨基-2-三氟顆粒蛋白前體Elisa
梨形毛霉 O,O-二乙基二硫代磷酸, 一般為谷受體2AElisa
屎腸球 庚酸乙酯生長分化因子7Elisa
中慢生華癸根瘤 4,4'-亞甲基-雙(3--2,6-二乙基苯)骨成型蛋白8AElisa
枯草芽孢桿 1-(2-芐氧基-4-氟苯基)乙酮生長分化因子6Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。