化工儀器網
詳細介紹
產品分類：核酸雜交
儲存條件：室溫,12個月
用途：用于將DNA轉移至不帶電荷的膜上
注意事項：由tris-hcl、氯化鈉組成。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
DNA中和緩沖液Ⅰ | 100ml | FS-R7405 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
芽孢桿菌屬胃動抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗糖蛋白抗體(GP)
釀酒酵母甘露聚糖結合凝集抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)
雙孢菇膜相關環指蛋白11抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)
異常威克漢姆酵母結核分枝桿菌Ag85B抗體Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
大腸埃希菌磷化微管相關蛋白4抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)
球孢白僵菌磷化微管相關蛋白4抗體Human NR1H2(Oxysterols receptor LXR-beta) ELISA Kit人抗鼠抗體(HAMA)
類布氏乳桿菌人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體Human UBR4(E3 ubiquitin-protein ligase UBR4) ELISA Kit人抗嗜中性粒胞漿抗體(ANCA)
礦泉水 鈣、鎂、、鈉、鍶、硒、偏硅 黑色瘤相關抗原G1/肝癌相關蛋白4抗體Human CRYAB(Alpha-crystallin B chain) ELISA Kit人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
栗疫菌黑色瘤相關抗原B6抗體Human GLB1(Beta-galactosidase) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
巴氏醋桿菌黑色瘤相關抗原C2抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗腎上腺皮質抗體(AAA)
釀酒酵母黑色瘤抗原樣基因2抗體Human HPR(Haptoglobin-related protein) ELISA Kit人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)
假交替單孢菌黑色瘤相關抗原C1抗體Human TALDO1(Transaldolase) ELISA Kit人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
日本慢生根瘤菌黑色瘤相關抗原B2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗抗體(GM1)
運動節桿菌黑色瘤相關抗原B4抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)
鄉間布丘氏菌組蛋白乙酰轉移抗體（腦膜瘤表達抗原5）Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)
葉點霉屬磷化微管相關蛋白4抗體Human COL4A1(Collagen alpha-1(IV) chain) ELISA Kit人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質量規格：BR,70萬u/ml液體乙
柑橘綠霉病Penicillium│digitatum (Pers.) Sacc. 質量規格：BR,活5萬,粉末
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)蘆丁
DNA中和緩沖液Ⅰhiston-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b規格： 48T
VCAM-1/CD6(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞粘附分子1規格： 48T
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit 小鼠糖皮質類固chun受體規格： 48T
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黃體生成su釋放激su規格： 48T
NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit 小鼠腦紅蛋白規格： 48T
化工儀器網