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產品分類：微生物染色

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：用于芽孢染色。真菌染色，尤其可用于布氏桿菌染色又稱科茲洛夫斯基染色

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

枯草芽孢桿菌羊毛甾14α-去甲基化蛋白抗體Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit人神經絲蛋白H(NF-H)免疫試劑盒

申氏不動桿菌*補體C5抗體Human NTRK2(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit人神經生長因子受體(NGFR)免疫試劑盒

單色下皮黑孔菌5號染色體開放閱讀框24抗體Human PⅢCP(Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit人神經生長因子前體(proNGF)免疫試劑盒

海欖雌小單孢菌5號染色體開放閱讀框42抗體Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人神經生長因子(NGF)免疫試劑盒

致密曲霉5號染色體開放閱讀框49抗體Human PACAP-38(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit人神經母瘤抗體(NB-Ab)免疫試劑盒

植物乳桿菌5號染色體開放閱讀框35抗體Human PADI4(Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit人(GM1)抗體(IgM)免疫試劑盒

云南紅球菌中心體蛋白192抗體Human MT3(Metallothionein 3) ELISA Kit人(GM1)抗體(IgG)免疫試劑盒

動球菌中心體蛋白27抗體Human N-ERC/Mesothelin ELISA Kit人神經膠質纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒

新城疫病中心體蛋白290抗體Human MT1M(Metallothionein 1M) ELISA Kit人神經激肽B(NKB)免疫試劑盒

嗜鹽堿球菌中心體蛋白63抗體Human NFE2L2(Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like 2) ELISA Kit人神經調節1亞型HRGβ1(NRG1)免疫試劑盒

紫萁小菇中心體蛋白70/p10結合蛋白抗體Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人神經調節蛋白4(NRG4)免疫試劑盒

彎孢菌中心體蛋白72抗體Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人神經調節蛋白3(NRG3)免疫試劑盒

Curvularia  cocis Matsush. 中心體蛋白95抗體Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人神經調節蛋白2(NRG2)免疫試劑盒

謝瓦曲霉中心體蛋白89抗體Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人神經穿透1(NPTX-1)免疫試劑盒

*蜜環菌CERD4蛋白抗體Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒

波茨坦芽孢桿菌CES1P1蛋白抗體Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：BSCD117分子試劑盒丁香樹脂雙葡萄糖苷

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>97%(HPLC),BCCD10分子試劑盒當藥寧

云南節叢孢Arthrobotrys│yunnanensis 質量規格：>98%,BRCC趨化因子受體7試劑盒丹參新
孔雀石綠水溶液KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人mei6規格： 96T

PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit  人磷suan化乙酰輔meiA規格： 48T

PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit  人磷suan甘油suan變位mei2規格： 48T

PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit  人前列腺suD合成mei規格： 48T

PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit  人肽酰脯氨酰異構mei(親環蛋白)樣1規格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。