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上海慧穎生物科技有限公司

CHO細胞培養說明

時間:2016-1-6閱讀:6664

                      CHO細胞培養說明

產品名稱:CHO細胞

中文名稱:中國倉鼠卵巢細胞(Chinese hamster ovary)

種屬:倉鼠

組織來源 卵巢

生長狀態 貼壁生長

細胞形態 上皮樣

CHO細胞具有不死性,可以傳代百代以上

CHO細胞培養

1、培養條件:

培養基類型:DMEM(Hyclone SH30243.01)培養基

FBS(GIBCO 16000-044): 10%

抗生素:雙抗

培養條件:37℃,CO2: 5%

2、傳代方法:

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態:

如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液,繼續培養。

如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。

貼壁細胞傳代方法:

1 )棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 )加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變圓后加*培養基終止消化。

懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。

1)直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

2)離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內, 1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養液到離心管內,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

 一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。

3、凍存方法:

70% *培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。

儲存:液氮中長期保存。

4、注意事項

1 )觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。

2 )在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養。

3 )收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請拍照并在一周內與我們。

 

來源:慧穎細胞庫 整理編輯

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