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Invitrogen原裝TRIZOL REAGENT(貨號:15596-026)

參   考   價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號:

品       牌:GIBCO/美國

廠商性質:生產商

所  在  地:上海市

更新時間:2024-08-09 08:00:31瀏覽次數:5320

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Invitrogen原裝TRIZOL REAGENT(貨號:15596-026)100ML 慧穎*中
TRIzol® 試劑是一種*的即用型試劑,可用于提取高質量的總RNA或者從各種生物樣本中同時提取RNA、DNA和蛋白質。這種酚和異硫氰酸胍單相溶液,可用于提取人、動物、植物、酵母或細菌來源的細胞和組織樣本中的純RNA、DNA和蛋白質,只需一個小時即可完成。

產品名稱:TRIZOL REAGENT試劑

品牌:Invitrogen

貨號:15596-026

規格:100ML

優惠價格:請致電

包裝:TRIZOL溶液,棕色瓶裝

現貨狀態:現貨

Invitrogen原裝TRIZOL REAGENT(貨號:15596-026)操作說明:

從組織中提取總RNA 1)液氮研磨,組織塊直接放入研體中,加入少量液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg組織/mlTrizol加入Trizol,轉移入離心管進行第2步操作。2) 勻漿:組織樣品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol,另外,組織體積不能超過Trizol體積的10%,否則勻漿效果會不好,用電動勻漿器充分勻漿約需1-2分鐘。從細胞中提取總RNA   1) 培養貼壁細胞:不須消化,可直接用Trizol進行消化、裂解,Trizol體積按10cm2/ml比例加入。   2) 懸浮細胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106動物、植物或酵母細胞,或107細菌細胞。   2.細胞或組織加Trizol后,室溫放置5min,使其充分裂解。注:此時可放入-70℃長期保持。  3.12000rpm 離心5min,棄沉淀。  4.按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振蕩混勻15分鐘,室溫放置15min。注:禁用漩渦振蕩器,   以免基因組DNA斷裂。  5.4℃12000g離心15min。   6.吸取上層水相,至另一離心管中。  注:1)千萬不要吸取中間界面。   2)若同時提取DNA和蛋白質,則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,則棄下層酚相。  7.按0.5ml異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇混勻,室溫放置5-10min。  8.4℃ 12000g離心10min,棄上清,RNA沉于管底。   9.按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇,溫和振蕩離心管,懸浮沉淀。  10.4℃ 8000g離心5min,盡量棄上清。   11.室溫晾干或真空干燥5-10min。注:RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。  12.可用50ul H2O,TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,55-60℃5-10min。  注:H2O、TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。  12、測O.D值定量DNA濃度。   注:1)此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之間。  2) 產率估計:組織標本:(ug RNA/mg組織)1-10ug,培養細胞(ug RNA/106 Cell):5-15ug。  注:1、組織或細胞量過少,可酌情減少Trizol用量。  2、組織或細胞用量過多,會引起DNA對RNA的污染。   3、高蛋白,脂肪或多糖類組織,肌肉組織或塊狀植物組織等,組織勻漿或液氮研磨  后須4℃ 1200離心10min去掉不溶物,再進行下面操作,若頂層有脂肪物,則  也須去掉。   4、熱天提RNA,帶手套是必須的,手是RNase的主要來源。   5、組織塊用液氮研磨,效果,若沒有液氮或電動勻漿器,可用手動勻漿器代替,  此時組織塊不宜過大,且需先用眼科剪將組織絞碎,然后再充分研磨。

 

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