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實驗技巧:流式細胞儀細胞周期結果分析
點擊次數:3402 發布時間:2013-7-24

*張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。
*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%
第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%
據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,但G2期下降了。
細胞周期是基于細胞處于不同分裂時期具有不同的DNA含量而分析細胞處于不同的時期的方法。確切的說結果中G1期的百分比實際上是G1+G0期細胞的百分比。 G2的百分比實際上是G2+M期細胞的百分比。
圖上zui高的峰代表了G1期(也稱2倍體峰),后面的代表G2期、S期(也稱4倍體峰)。
1、細胞周期的概念
細胞由一次分裂結束到下一次分裂結束,都要經歷相同的變化階段(即G1→S→G2→M )周而復始地進行活動,細胞的這種生長、分裂循環即稱為細胞周期(cell cyc1e)。一個細胞周期包括有絲分裂期(M)和分裂間期(G1、S、G2)。盡管在各種細胞中各期所占時間都不盡相同,但相對而言M期zui短,S期卻較長。
2、分裂間期
(1)G1期
前一次有絲分裂完成到S期開始。各種與DNA復制有關的酶明顯增多,線粒體、葉綠體、核糖體增多,內質網在更新擴大,高爾基體、溶酶體都增加,中心粒彼此分離、復制。
(2)S期
DNA、組蛋白合成
(3)G2期
S期結束后到有絲分裂開始。由上可以看出G2期、S期、M期反映了細胞的增殖活性,特別是G2期、S期(因M期較短)。因而,G2/M%+S%反映了細胞增殖能力。二者有無差別要進行統計檢驗。
3、細胞周期阻滯
對于生殖細胞及保持增殖能力的細胞(如干細胞),由于細胞不斷的增殖, 細胞總是處于從G1 、S、G2 和M 期的連續的細胞周期中。 在細胞周期的各階段, 細胞分別進行著DNA 復制、蛋白質合成及細胞分裂等重要的生理活動。每一階段都是下一階段的準備期, 真核細胞可以在啟動下一個周期前監測與一個細胞周期順利完成相關的生化事件,這包括各種體內外因素威脅下游事件進行時可逆地將細胞周期阻滯在特定的生理階段的能力,而這種特定的生理階段稱為檢定點(checkpoint) 。只有前一階段的生理活動完成后,才能通過稱為檢定點的階段,進入周期的下一步,一些突發事件引發的細胞反應能影響驅動細胞周期前進的因子,從而使細胞周期停滯在檢定點, 這被稱為細胞周期阻滯(cell cycle arrest)。
比較相應的細胞G1 、S、G2 期差異有無統計學意義,才能說有無細胞周期阻滯。