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技術(shù)文章
士鋒生物神經(jīng)系統(tǒng)染色技術(shù)介紹
點(diǎn)擊次數(shù):841 發(fā)布時(shí)間:2013-10-31
神經(jīng)病理學(xué)是組織病理學(xué)的一個(gè)重要組成部分,神經(jīng)病理學(xué)技術(shù)是一門較特殊的病理技術(shù)。神經(jīng)組織的結(jié)構(gòu)和功能較為復(fù)雜的特殊,用常規(guī)方法處理,常得不到想要的東西,因此,要想獲取想要的東西,必須靠特殊的處理方法,才能將其充分地顯示出來(lái)。神經(jīng)系統(tǒng)方面可顯示的物質(zhì)較多,如尼氏小體、髓鞘、變性髓鞘、神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等等。這些都要靠特殊的銀浸染技術(shù),才能顯示出來(lái)。下面將介紹幾種顯示上述物質(zhì)的方法。
應(yīng)用:神經(jīng)系統(tǒng)染色應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)方面的各種疾病,如創(chuàng)傷、中毒、感染等引起神經(jīng)系統(tǒng)方面的疾病,應(yīng)作正常髓鞘和變性髓鞘的染色,以觀察髓鞘的變化及脫失情況,如脫髓鞘假瘤與彌漫的纖維星型細(xì)胞瘤鏡下有非典型性核分裂象和彌漫浸潤(rùn)的單核細(xì)胞,充分發(fā)育的巨噬細(xì)胞缺少細(xì)胞將會(huì)誤診為膠質(zhì)瘤,應(yīng)作膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)纖維染色。
(一)蘇木素VG法染中樞神經(jīng)
1、切片脫蠟至70%酒精
2、Weigert氏鐵蘇木素染10分鐘
3、自來(lái)水稍洗
4、如有必要,用1%鹽酸酒精分化
5、流水洗10-15分鐘
6、VG液染30分鐘
7、蒸餾水快洗
8、95%酒精分化
9、脫水、透明、封固
結(jié)果:細(xì)胞:灰黑色
髓鞘:灰白色
膠原:紅色
肌纖維:黃色
神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞漿 黃色/琥珀色
膠質(zhì)纖維 琥珀色
(二)神經(jīng)細(xì)胞尼氏體染色
正常的神經(jīng)細(xì)胞都含有一定數(shù)量的尼氏化,它們主要分布于神經(jīng)細(xì)胞的漿中,形狀有大有小,如三角形,有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍(lán)色染料所染色,這些染料如焦油堅(jiān)牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(lán)(methylene blue)甲苯胺藍(lán)(toluidine blue)硫董(thionin)等鈄其染為藍(lán)色。但是,當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受傷后,胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化,嚴(yán)重的可消失。
焦油堅(jiān)牢紫顯示尼氏體
焦油堅(jiān)牢紫 1g
蒸餾水 100ml
操作方法:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅(jiān)牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、*脫水,二甲苯透明,中性樹膠
結(jié)果:神經(jīng)細(xì)胞單位:紫-藍(lán)色
細(xì)胞核:紫-藍(lán)色
尼氏體:紫-深藍(lán)色
注意:1、應(yīng)用酒精分化切片,要迅速,防止過(guò)度分化,將切片上的顏色全部脫掉。
神經(jīng)纖維染色