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技術文章

士鋒生物腸道桿菌的檢測

點擊次數:1478 發布時間:2014-3-24

一、主要腸道桿菌的形態、培養特征 
(一)形態觀察 
1. 大腸桿菌(革蘭氏染色標本)革蘭氏染色陰性,中等大小球桿菌,兩端純圓,呈現分散排列。 
2. 傷寒桿菌(革蘭氏染色標本)革蘭氏染色陰性,中等大小球桿菌,散在分布。 
3. 痢疾桿菌(革蘭氏染色標本)革蘭氏陰性桿菌。 
(二)培養特性 
1. 大腸桿菌:在普通瓊脂平板上形成圓形、中等大小、灰白、半透明,邊緣整齊光滑之菌落,有特殊氣味。在EMB平板上菌落呈現紫黑色,有金屬光澤。在MCK平板上菌落呈紅色。 
2. 傷寒桿菌:在普通瓊脂平板上菌落為園形,中等大小、灰白、半透明,邊緣整齊、表面光滑。在EMB平板上,菌落較小,無色半透明。在MCK平板上菌落較小,無色半透明。 
3. 痢疾桿菌:菌落特征同傷寒桿菌。 
二、糞便標本中腸道病原菌分離鑒定 
糞便中的細菌種類很多,要檢出病原菌,通常應用具有選擇性或鑒別性的培養基,其特點是此類培養基中除含有細菌所需的營養物質外,還含有抑菌劑和指示劑。可選擇性的抑制沙門氏桿菌和痢疾以外的其它腸道桿菌生長,指示劑則可用以鑒別細菌的生化特性。其檢驗程序如下。 
(一)標本采集 
采取標本時應注意病情和病程,盡量在未使用抗菌素之前,選取膿血或粘液部分。取材后應立即送檢。如不能立即送檢,可將本本保存于30%甘油緩沖鹽水中。 
(二)分離培養 
【材料】 
EMB平板,MCK平板。 
【方法與結果】 
用接種環挑取少量糞便標本,以分離劃線法接種于EMB平板或MCK平板上,置37℃培養18-24小時,觀察平板上的菌落,依據其大小,透明度和顏色等特點,初步識別可疑致病菌和非致病菌菌落。

三)初步鑒定
【材料】
雙糖鐵培養基
【方法與結果】
將可疑菌落接種于雙糖鐵培養基中,經37℃培養18-24小時,觀察培養基變化。

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