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技術文章

士鋒生物植物細胞死活鑒定

點擊次數:847 發布時間:2014-3-25

1、 用質壁分離法鑒定細胞死活
(1) 原理
活細胞與死細胞在性質上有許多差別,特別是透性的變化zui為明顯,活細胞的原生質具有分別透性;而死細胞則為通透性。分別透性是質壁分離的先決條件,因此能發生質壁分離的細胞就表示是活的,不能發生質壁分離的則說明是死的。
(2) 儀器藥品及材料
洋蔥及其它植物材料、酒精燈、顯微鏡、小刀、鑷子、玻璃片、1M蔗糖
(3) 實驗步驟
撕洋蔥表皮細胞滴加1M蔗糖中,在顯微鏡下觀察,細胞很快發生質壁分離的,這就是活細胞活著的證據。另把撥取的同樣制片,用冷凍,加熱,干燥,酒精浸蘸等辦法將它們的細胞殺死,然后取代上述活材料,做質壁分離實驗,結果看到已死的細胞,不能發生質壁分離現象。
用尿素、KNO3、CaCl2等來代替蔗糖,能快速鑒定細胞死活。

2、 活體染色法鑒定細胞死活
(1)原理
死活細胞間不但透性不同,而且PH等情況也不同,他們對某些染料的反映明顯不同,某些染料能在活細胞的細胞液中積累而不染活原生質,但能使死細胞的原生質染色而無積累于液泡的現象,所以可根據某些染料活體染色的情況來鑒定細胞死活。
(2)儀器、藥品及材料
顯微鏡、鑷子、載玻片、刀片、0.01%中性水溶液、1M蔗糖溶液、小麥、洋蔥、水稻、白菜、棉花或其它植物。
(3)實驗步驟
(4)取洋蔥或其它材料,用鑷子撕下表皮(如表皮不易撕下,也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多余分部分),或用刀片作切片若干,將表皮或切片浸入中性溶液5-10分鐘,取出用清水浸洗后置于載玻片水滴內,加蓋玻片,在顯微鏡下觀察。

活細胞一般在液泡內染成紅色至紫色,原生質不染色,死細胞常成橙紅色,原生質和細胞核染色。撕破的細胞,只剩細胞壁時,呈淡紅色或淡紫色。
為了進一步鑒別死活,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴1M蔗糖溶液,便可觀察到活細胞能發生質壁分離,死細胞及空細胞都沒有這種現象。
可用加熱,冷凍或其它辦法殺死植物組織,然后用上面所述方法進行處理,比較與活組織有何不同。
記錄結果,并加以解釋。

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