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考馬斯亮藍(lán)快速染色液 使用說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù)：7359 發(fā)布時(shí)間：2016-7-1
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
考馬斯亮藍(lán)快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考馬斯亮藍(lán)G250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的快速染色，亦可用于Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測(cè)。
NobleRyder考馬斯亮藍(lán)快速染色液采用NobleRyder自主研發(fā)的技術(shù)，在傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)快速染色液的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良，是一種無(wú)毒的染色液，快速染色液只需1h，可以檢測(cè)低達(dá)100ng的蛋白電泳條帶。其核心優(yōu)點(diǎn)在于：無(wú)需對(duì)凝膠進(jìn)行固定，無(wú)需煮沸，無(wú)需脫色，染色時(shí)間短，操作更加簡(jiǎn)單。
產(chǎn)品組成：
編號(hào) 名稱(chēng) | P2813 100ml | P2813 500ml | Storage |
100ml | 500ml | RT 避光 | |
使用說(shuō)明書(shū) | 1份 | ||
自備材料：
1、水平搖床或側(cè)擺搖床
2、蒸餾水
3、(可選)加熱裝置
4、20%甘油水溶液
操作步驟(僅供參考)：
1、PAGE電泳結(jié)束后取凝膠放入約50～100ml蒸餾水中，在搖床上搖動(dòng)5min，棄液，重復(fù)上述步驟1次。
2、棄蒸餾水，加入3～5倍體積以上的Commassie Blue Fast staining solution，使染色液能蓋住凝膠。
3、(可選)凝膠置于考馬斯亮藍(lán)快速染色液中，在水浴鍋或微波爐內(nèi)加熱至95～100℃，立即從加熱裝置中取出。(此步驟可以使染色提高靈敏度或加快染色進(jìn)程，亦可省略。)
4、在搖床上搖動(dòng)染色，蛋白量大的條帶10～15min左右會(huì)出現(xiàn)，大部分蛋白條帶會(huì)在30～60min 左右出現(xiàn)。一般情況下，5h能獲得效果。
5、出現(xiàn)清晰的目標(biāo)蛋白條帶即可停止染色，棄染色液。
6、加入適量的蒸餾水停止染色反應(yīng)。亦可以在搖床上搖動(dòng)脫色5～10min，以便減少背景干擾。
7、把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油水溶液中，長(zhǎng)期保存可以制備干膠。
注意事項(xiàng)：
1、PAGE電泳后凝膠采用蒸餾水清洗的目的在于去除凝膠中的SDS等干擾物質(zhì)。如果不能充分去除SDS會(huì)導(dǎo)致背景較高。如果凝膠很厚，洗滌時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)、洗滌次數(shù)應(yīng)適當(dāng)增加。蒸餾水洗滌去除凝膠中的雜質(zhì)時(shí)，如果使用經(jīng)過(guò)加熱或沸騰的蒸餾水，每次洗滌時(shí)間可以縮短至 1～2min。
2、染色時(shí)如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱，可以大大加快染色速度。但加熱時(shí)宜盡量避免沸騰，以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。
3、如果希望染色的背景更低，希望獲得更加清晰的蛋白條帶，可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過(guò)蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡一段時(shí)間可以獲得背景更低，條帶更清晰的條帶。在次日對(duì)4℃蒸餾水浸泡一段時(shí)間的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果，獲得更好的染色蛋白條帶。
4、本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)作必要防護(hù)。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見(jiàn)問(wèn)題：
1、無(wú)染色條帶：可能上樣量太少，建議電泳時(shí)加適當(dāng)量的BSA等作為陽(yáng)性對(duì)照。
2、背景太高：可能雜質(zhì)沒(méi)有除盡，建議延長(zhǎng)zui初的蒸餾水洗滌時(shí)間或增加洗滌次數(shù)。也可以在完成染色后，把凝膠放置在蒸餾水中在室溫或4℃進(jìn)行洗滌。在4℃蒸餾水中浸泡一段時(shí)間，通?？梢匀〉幂^好的脫色效果。
3、染色條帶的靈敏度不夠理想：可以使用考馬斯亮藍(lán)快速染色液進(jìn)行重復(fù)染色，重復(fù)染色可以改善染色效果。在加熱情況下染色可以顯著提高檢測(cè)靈敏度，另外染色后在室溫或4℃用蒸餾水進(jìn)行脫色也可以顯著改善染色的靈敏度。
有效期：12個(gè)月有效。