Qiagen203601/203603/203605/203607/203609

快速、高特異性擴增，適合多種應用

• 高特異性PCR，所需優化次數少

• 快速激活熱啟動酶，只需5分鐘

• 即用型PCR上樣緩沖液，操作更簡單快速

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該聚合酶具備高特異性、高靈敏度，HotStarTaq DNA Polymerase所需的優化次數少，激活時間為5分鐘。可在室溫下構建PCR反應體系，且反應產物可直接上樣至凝膠，因為新型的CoralLoad PCR緩沖液包含兩種凝膠示蹤染料。同時提供標準QIAGEN PCR緩沖液，便于操作。此外，一種新型的添加劑Q-Solution可確保高效擴增難擴增的模板（如富含GC的模板）。*的試劑盒組成和經優化的實驗方案使PCR流程更加高效。

Performance

每一批HotStarTaq Plus DNA Polymerase都經過*的質量控制測試，包括：嚴格的PCR特異性和重復性分析，即使低拷貝的靶分子也可擴增。通過檢測，HotStarTaq Plus DNA Polymerase優于其它供應者提供的試劑盒，確保高度特異性和在熱啟動PCR中的表現（參見"Highest specificity"、"Higher specificity with different primer–template systems"和表格）。該試劑盒提供的新型PCR緩沖液使得在多種PCR條件下都維持高特異性，無需優化。Q-Solution可進一步優化PCR，且該試劑盒中提供（參見"Amplification of difficult templates"）?？傊@些組合確保了在多種應用中的特異性擴增（參見"Effect of hot start on RT-PCR performance"和"Highly sensitive single-cell PCR"）。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase特性

濃度：5 units/µl
重組酶：是
底物類似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C條件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C條件下10 min，94°C條件下60 min
擴增效率：≥10⁵倍
5'–>3'外切酶活性：是
額外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自啟活性：否

Qiagen203601/203603/203605/203607/203609

Principle

HotStarTaq Plus DNA Polymerase具備同HotStarTaq DNA Polymerase一樣的表現，激活時間只需5分鐘。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase，是一種經修飾的QIAGEN Taq DNA Polymerase，以非活性形式提供，常溫下沒有聚合酶活性。避免PCR構建和循環初始階段低溫條件下非特異性引物的延伸和引物二聚體的形成（參見"Highest specificity"和"Higher specificity with different primer-template systems"）。95°C條件下孵育5分鐘即可激活HotStarTaq Plus DNA Polymerase，這個步驟可整合入已有的熱循環程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通過提高每個PCR擴增退火過程特異性引物的結合比例，確保PCR每個循環特異性擴增（參見"Increased specificity of primer annealing"）。*的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡組合，使得該緩沖液與傳統的PCR緩沖液相比在很寬的溫度和Mg²⁺濃度范圍內都有嚴格的引物退火條件和高度的特異性，無需進行耗時的優化。

CoralLoad PCR Buffer

HotStarTaq Plus DNA Polymerase同時提供CoralLoad PCR Buffer，CoralLoad PCR Buffer具備QIAGEN PCR Buffer的所有優點，同時可直接將PCR產物上樣到瓊脂凝膠上，無需加入凝膠上樣緩沖液。CoralLoad PCR Buffer具備同樣高的PCR特異性，與常規的QIAGEN PCR Buffer一樣可減少優化過程。此外，它包含兩種指示染料，橙色染料和紅色染料，可方便的判斷DNA的遷移距離和優化跑膠時間（參見"CoralLoad PCR Buffer"）。該緩沖液提高移液的可見性，并可直接將PCR產物上樣至凝膠，提高便利性。

Q-Solution

該產品同時提供Q-Solution，一種新型的PCR添加劑，通過修飾DNA熔解行為促進難擴增模板的擴增。這種*的試劑可進一步優化由模板引起的表現不理想的PCR，如過多的二級結構和富含GC的模板（參見"Amplification of difficult templates"）。不同于DMSO和其他PCR添加劑，Q-Solution的濃度是確定的，沒有*性，并且保證PCR的純度。而且PCR中加入Q-Solution不會影響PCR的準確性。

Procedure

HotStarTaq Plus DNA Polymerase提供高效、經優化的實驗方案，用于快速、方便的構建PCR反應體系。95°C條件下孵育5分鐘激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的熱循環程序。反應可在室溫下建立，更加方便和易于使用（參見"HotStarTaq Plus procedure"）。該試劑盒同時提供CoralLoad PCR Buffer，提高移液的可見性，并可直接將PCR產物上樣至凝膠，提高便利性。

Applications

HotStarTaq Plus DNA Polymerase適合多種應用，包括各種富有挑戰性的研究，如各種擴增應用：

• 復雜的基因模板

• 復雜的cDNA模板（如RT-PCR）

• 低拷貝的靶分子（如單細胞PCR）

• 多重引物對反應