成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法)

產(chǎn)品簡介：

在成骨分化過程中，其最基本的生物學特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟，而礦化結(jié)節(jié)是成骨細胞分化成熟的標志，同時也是成骨細胞行使成骨功能的主要形態(tài)學表現(xiàn)，觀察成骨細胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細胞分化的常用手段之一。 成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法，四環(huán)素染色法是利用四環(huán)素與礦化結(jié)節(jié)中的鈣鹽形成熒光的磷酸復合物，可用熒光顯微鏡觀察。

NobleRyder 成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液

產(chǎn)品組成：

自備材料：  

1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)

2、培養(yǎng)基

3、蒸餾水

4、熒光顯微鏡

操作步驟(僅供參考)：

1、成骨細胞經(jīng)培養(yǎng)，yi酶消化，接種培養(yǎng)于6孔板中，每孔有1x105個細胞。

2、培養(yǎng)基中添加1%-2%四環(huán)素溶液，細胞連續(xù)觀察、換液，培養(yǎng)14天。

3、小心吸除培養(yǎng)液，磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次。

4、加入足量Ob固定液固。

5、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2。

6、加入DAPI染色液染色5-8min。

7、輕輕吸除染色液,用磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次。

8、直接在熒光顯微鏡快速觀察，或抗熒光封片劑封片后再觀察。

染色結(jié)果：

注意事項：

1、四環(huán)素溶液為無菌溶液，可以一次性分裝小份保存，注意避免染菌；使用時常溫溶解后與培養(yǎng)基按1:100比例混合后使用。

2、Ob固定液宜揮發(fā)，開啟后應密封保存。

3、DAPI染色后應盡快觀察，以免熒光消失，影響觀察。也可以用抗熒光淬滅封片劑處理。

4、DAPI不宜反復凍融，否則容易失效。且對人體有一定刺激性，請注意做好防護。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。

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