QQ交談
您所在位置：產品搜索
請輸入產品關鍵字：
聯(lián)系方式
地址：北京市海淀區(qū)馬連洼北路128號百草園3號樓2單元503
郵編：100193
聯(lián)系人：江經理
電話：86-10-62817090
傳真：86-10-62817090
手機：18911522826,18001252729
留言：發(fā)送留言
個性化：www.bjnobleryder.com
網(wǎng)址：
商鋪：http://www.grannyfreesex.com/st236942/
郵編：100193
聯(lián)系人：江經理
電話：86-10-62817090
傳真：86-10-62817090
手機：18911522826,18001252729
留言：發(fā)送留言
個性化：www.bjnobleryder.com
網(wǎng)址：
商鋪：http://www.grannyfreesex.com/st236942/
供求商機
【產品簡介】
本公司供應化學試劑的SDS裂解液，*，歡迎洽談。
【詳細說明】
SDS裂解液
本公司供應化學試劑的SDS裂解液，*，歡迎洽談。
們生產的SDS裂解液（SDS Lysis Buffer）是一種比較強烈的細胞組織裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、ChIP（染色質免疫共沉淀，chromatin immunoprecipitation）等。
關于我們生產的不同的裂解液的主要特點和差異，以及如何選擇裂解液可參考附錄。
SDS裂解液的主要成分為50mM Tris（pH8.1），1% SDS，以及2mM sodium pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
用SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
關于我們生產的不同的裂解液的主要特點和差異，以及如何選擇裂解液可參考附錄。
SDS裂解液的主要成分為50mM Tris（pH8.1），1% SDS，以及2mM sodium pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
用SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
使用說明：
對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解SDS裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍（如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗）。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后，細胞就會被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP，建議6孔板每孔細胞至少加入200微升裂解液。
對于組織樣品：
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解SDS裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量。）
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
5. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
用于普通的Western、IP或co-IP，我們推薦使用Western及IP細胞裂解液（P1001），該裂解液已被國內各大研究機構廣泛使用，用戶普遍反映很好。裂解細胞或組織后，沒有非常粘滯的透明狀DNA團塊形成，不必采用超聲處理等就可以非常理想地用于后續(xù)操作。另外該裂解液裂解的產物也適合用于磷酸化蛋白的Western檢測。
對于某些特殊蛋白的IP，如果發(fā)現(xiàn)Western及IP細胞裂解液（P1001）效果不是非常理想，可以嘗試用RIPA裂解液（強、中或弱）或NP-40裂解液。如果發(fā)現(xiàn)IP的時候背景很高，即非特異的蛋白也被IP下來，則需要選用裂解強度較高的裂解液，例如RIPA裂解液（強或中）。如果發(fā)現(xiàn)目的蛋白無法被IP下來，則說明裂解液的強度過強，可以使用較為溫和的裂解液例如RIPA裂解液（弱）或NP-40裂解液。
對于某些難溶解蛋白的Western，如果發(fā)現(xiàn)Western及IP細胞裂解液（P1001）效果不是非常理想，可以嘗試使用裂解強度更高的裂解液例如RIPA裂解液（強、中）或SDS裂解液。
對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解SDS裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍（如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗）。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后，細胞就會被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP，建議6孔板每孔細胞至少加入200微升裂解液。
對于組織樣品：
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解SDS裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量。）
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
5. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
用于普通的Western、IP或co-IP，我們推薦使用Western及IP細胞裂解液（P1001），該裂解液已被國內各大研究機構廣泛使用，用戶普遍反映很好。裂解細胞或組織后，沒有非常粘滯的透明狀DNA團塊形成，不必采用超聲處理等就可以非常理想地用于后續(xù)操作。另外該裂解液裂解的產物也適合用于磷酸化蛋白的Western檢測。
對于某些特殊蛋白的IP，如果發(fā)現(xiàn)Western及IP細胞裂解液（P1001）效果不是非常理想，可以嘗試用RIPA裂解液（強、中或弱）或NP-40裂解液。如果發(fā)現(xiàn)IP的時候背景很高，即非特異的蛋白也被IP下來，則需要選用裂解強度較高的裂解液，例如RIPA裂解液（強或中）。如果發(fā)現(xiàn)目的蛋白無法被IP下來，則說明裂解液的強度過強，可以使用較為溫和的裂解液例如RIPA裂解液（弱）或NP-40裂解液。
對于某些難溶解蛋白的Western，如果發(fā)現(xiàn)Western及IP細胞裂解液（P1001）效果不是非常理想，可以嘗試使用裂解強度更高的裂解液例如RIPA裂解液（強、中）或SDS裂解液。
保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項：
為取得*的使用效果，盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
關于裂解液的選擇，一方面可以參考我們生產的各種裂解液主要特點、差異，選擇合適的裂解液；另一方面也需要通過一些預實驗來摸索*的適合您實驗條件的裂解液。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
-20℃保存，一年有效。
注意事項：
為取得*的使用效果，盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
關于裂解液的選擇，一方面可以參考我們生產的各種裂解液主要特點、差異，選擇合適的裂解液；另一方面也需要通過一些預實驗來摸索*的適合您實驗條件的裂解液。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
| 貨號 | 產品名稱 | 品牌 | 規(guī)格 | 價格（元） |
| P0910 | NP-40裂解液 | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0160 | PMSF（100mM） | NobleRyder | 1/10ml | 30.00/100.00 |
| P0902 | RIPA裂解液（強） | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0908 | RIPA裂解液（強中弱套裝） | NobleRyder | 3*50ml | 280.00 |
| P0906 | RIPA裂解液（弱） | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0904 | RIPA裂解液（中） | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0912 | SDS裂解液 | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0907 | Western及IP細胞裂解液 | NobleRyder | 100ml | 220.00 |
| P0916 | 非變性細胞裂解緩沖液 | NobleRyder | 100ml | 220.00 |