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(一)厭氧箱操作室厭氧環(huán)境形成:
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋;
2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度;
3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);
4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;
5. 厭氧箱操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):
A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋;B. 接通氮氣進(jìn)氣路,打開氮氣控制閥1,使二只塑料袋充足氮氣,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;D. 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸放于操作室內(nèi),至全部放出。
6. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
7. 操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;B. 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣閥3,并打開閥5,使混合氣經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);D. 通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
9. 開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。
(二)厭氧箱注意事項
1. 厭氧箱盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
2. 開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;
3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入;
4. 如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);
5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;
6. 調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;
7. 真空泵按要求使用,定期檢查加油。
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