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Acridine Orange屬于三環雜芳香燃料,可以標記DNA、RNA,屬于異染性熒光染料。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色,因此AO常用于細胞內DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有:1、插入性結合,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,這種結合方式主要為AO與DNA的結合,其熒光發射峰為530nm,激發后呈綠色熒光;2、靜電吸引,帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負電荷)產生靜電間的吸引結合,這種結合方式主要為AO與RNA的結合,其熒光發射峰為640nm,激發后呈紅色熒光,少量結合會呈橘黃色或桔紅色熒光,因此吖啶橙嵌合到雙鏈DNA中顯綠色,與單鏈DNA或RNA結合時發橘黃色或橙紅色熒光。
Leagene AO染色液(1mg/ml)為儲存液,使用時應稀釋到合適濃度后使用,染色后在熒光顯微鏡下觀察,AO可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片段,形成凋亡小體。AO使其染上致密濃染的黃綠色螢光或黃綠色碎片顆粒,而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失;AO染色常與EB染色合用雙染,因EB只染死細胞使之產生橘黃色熒光,由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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