高靈敏度:能夠敏銳地檢測到極微量的人絲氨/酸蛋白酶,檢測下限可達皮克級別。這一特性使得在絲氨/酸蛋白酶低表達的樣本中,也能精準測定其含量,為深入探究絲氨/酸蛋白酶在生理和病理狀態下低水平表達時的功能提供了有力支撐。
特異性強:試劑盒內的抗體經過嚴格篩選與優化,對人絲氨/酸蛋白酶具有ji高特異性,與其他蛋白酶及干擾物質幾乎不存在交叉反應。這有效杜絕了假陽性結果的出現,極大地保障了檢測結果的準確性與可靠性。
重復性佳:憑借嚴格的生產工藝和完善的質量控制體系,該試劑盒批內和批間重復性表現卓yue。多次重復檢測同一批次樣本,結果的變異系數(CV)被嚴格控制在極小范圍,實驗人員能夠獲取穩定且可重復的數據,有力地支持了科學研究的可重復性。
操作便捷:試劑盒配備了齊全的試劑以及詳盡的操作說明書,實驗步驟清晰明了。即便新手實驗人員,也能快速上手操作。整個檢測流程無需復雜的儀器設備和高深的專業技能,顯著節省了實驗時間與人力成本。
檢測范圍寬:其檢測范圍覆蓋了人絲氨/酸蛋白酶在正常生理以及多種病理狀態下常見的濃度區間。既能精準檢測正常情況下低水平的絲氨/酸蛋白酶表達,也能準確測定在疾病或實驗干預后可能出現的高水平絲氨/酸蛋白酶變化,適用于各類相關研究場景。
樣本準備:根據實驗目的收集血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清等樣本。確保樣本采集過程規范,避免污染、溶血等情況干擾檢測結果。若樣本采集后需保存,應置于 - 20℃或 - 80℃冰箱,防止反復凍融。
試劑準備:從冰箱取出試劑盒,使其恢復至室溫。按照說明書依次準備好標準品、酶標抗體、底物、洗滌液等試劑。標準品需進行系列倍比稀釋,用于繪制標準曲線。
加樣:將稀釋好的標準品和處理后的樣本加入預包被有抗人絲氨/酸蛋白酶抗體的微孔板中,同時設置空白對照孔。輕輕振蕩使液體混合均勻,隨后將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,促使樣本中的絲氨/酸蛋白酶與包被抗體充分結合。
洗滌:孵育結束后,倒掉孔內液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,以清除未結合的物質,降低非特異性背景信號。每次洗滌后要將微孔板拍干,確保洗滌效果。
加酶標抗體:向每孔加入適量酶標抗體,再次輕輕振蕩混勻,放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,讓酶標抗體與已結合在包被抗體上的絲氨/酸蛋白酶結合。
再次洗滌:重復洗滌步驟,去除未結合的酶標抗體。
顯色:向每孔加入底物工作液,輕輕振蕩混勻,將微孔板置于 37℃避光環境孵育,此時酶標抗體上的酶會催化底物顯色,顏色會逐漸變深。
終止反應:當顯色達到預期效果,加入終止液終止反應。溶液顏色隨即固定,應立刻使用酶標儀在特定波長下測定各孔吸光度值。
結果計算:根據標準品的吸光度值繪制標準曲線,依據樣本的吸光度值從標準曲線上查出對應的絲氨/酸蛋白酶濃度,并結合樣本的稀釋倍數進行校正,最終得出樣本中絲氨/酸蛋白酶的實際濃度。
凝血機制研究:在凝血過程中,多種絲氨/酸蛋白酶如凝血yin子 Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ 等發揮著關鍵作用。通過該試劑盒檢測這些絲氨/酸蛋白酶的含量,有助于深入了解凝血機制,為出血性疾病和血栓性疾病的診斷、治療及預防提供理論依據。
腫瘤研究:部分絲氨/酸蛋白酶在腫瘤的發生、發展和轉移過程中起重要作用。例如,尿ji酶型纖溶酶原激活劑(uPA)作為一種絲氨/酸蛋白酶,其活性與腫瘤細胞的侵襲和轉移能力密切相關。檢測腫瘤患者樣本中相關絲氨/酸蛋白酶的含量,可輔助腫瘤的早期診斷、病情監測及預后評估,同時為腫瘤靶向治療提供潛在靶點。
炎癥研究:在炎癥反應中,絲氨/酸蛋白酶參與炎癥介質的激活和釋放過程。通過檢測炎癥患者樣本中絲氨/酸蛋白酶的含量變化,有助于了解炎癥的發生、發展機制,為抗炎藥物的研發和治療方案的制定提供重要參考。