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大鼠細胞間粘附分子1試劑盒

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產品型號:

品       牌:其他品牌

廠商性質:代理商

所  在  地:上海市

更新時間:2025-03-12 13:57:36瀏覽次數:688

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供貨周期 一個月 應用領域 化工,生物產業,制藥/生物制藥
大鼠細胞間粘附分子1試劑盒多為 ELISA 法,能測血清等標本中該分子含量,操作有步驟規范,檢測時需留意諸多注意事項 。

大鼠細胞間粘附分子1試劑盒

大鼠細胞間粘附分子1試劑盒主要有 ELISA 試劑盒和化學發光免疫分析試劑盒等類型,以下以 ELISA 試劑盒為例介紹:

檢測原理


通常采用雙抗體夾心法。將純化的大鼠抗細胞間粘附分子 1 抗體包被于微孔板,制成固相抗體,加入含細胞間粘附分子 1 的樣品,再與 HRP 標記的 ICAM-1 抗體結合,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物,經洗滌后加底物 TMB 顯色,TMB 在 HRP 酶催化下轉化成藍色,在酸作用下轉化為黃色,顏色深淺和樣品中的細胞間粘附分子 1 呈正相關,用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度,通過標準曲線計算樣品中 ICAM-1 含量。

標本類型


血清、血漿、細胞上清液、腦脊液、腹腔液等。

操作步驟


以慧嘉生物的試劑盒為例:

  1. 進行標準品的稀釋與加樣,設置不同濃度梯度。

  2. 加樣,分別設空白孔、待測樣品孔,加樣至酶標板孔底部并輕輕混勻。

  3. 用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

  4. 將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。

  5. 小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

  6. 每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

  7. 再次 37℃溫育。

  8. 重復洗滌步驟。

  9. 每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑 B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15 分鐘。

  10. 每孔加終止液 50μl,終止反應。

  11. 以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度。

注意事項


  1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

  3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,一次加樣時間控制在 5 分鐘內。

  4. 標本中待測物質含量過高時,需先稀釋后再測定,計算時乘以總稀釋倍數。

  5. 封板膜只限一次性使用。

  6. 底物請避光保存,嚴格按說明書操作,試驗結果以酶標儀讀數為準。


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